EmbryoGlue移植液对胚胎移植后临床结局的影响

胚胎移植是体外受精一胚胎移植(( Ln 2%atro fertili- nation-embryo transfer, IVF-ET)技术的关键环节之一。如何模仿人体输卵管和子宫内部环境，创造一个安全、稳定、高效的胚胎移植环境一直是生殖医学领域的研究重点。研究证实，人类输卵管和子宫内存在透明质酸1)，而透明质酸又与胚胎种植关系密切2 EmbrvoGlue是一种模仿人体输卵管和子宫内环境，专门为胚胎移植而设计的移植液，含有胚胎种植所需要的透明质酸和其他各种营养物质本研究的目的是探讨Fmbrvo Glue移植液是否有助于提高人类 I VF-FT的成功率。

资料与方法

1.1分组 选择2011年9月一2012年5月于郑州大学第三附属医院生殖医学中心接受I} E-ET的患者为研究对一象。纳人标准:女方年龄蒸40岁，既往失败周期数毛3个采用EmbrvoGlue作为移植液的共232周期(EmbryoGlue组)，采用G-2作为移植液的共268 周期(G-2组)。

1.2超促排卵方案根据患者情况采用长方案或短方案超促排卵。阴道B超下至少有2个卵泡直径)20 m m时，当晚肌内注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)(丽珠制药厂)10 000 10 ; 36一38 h 后经阴道B超引导穿刺取卵，根据适应证采用常规体外受精(in vitro fertilization , IVF)或卵胞质内单精子注,}j}- ( intracytoplasmic sperm injection , TCST;受精后第1 }3天观察胚胎发育情况本研究所用墙养液G-1 V F , G-1 , G-2及Rm brvoGl u e均为\Vitrolife公司产品

1.3月玉胎评级及选择 胚胎评级标准如下I级胚胎:卵裂球大小均匀，形状规则，透明带完整，胞质均匀、清晰，无颗粒现象，碎片少于5% ; II级胚胎:细胞大小略不均，形状略不规则，胞质碎片占5%}20%;III级胚胎:细胞大小明显不均，可有明显的不规则形状，胞质内可有颗粒现象，碎片占2107c}49%;I}级胚胎:细胞大小严重不均，胞质可有严重脱颗粒现象.碎片占5 0 ch以上。I ,II级胚胎为优质胚胎;I , 1T和IQ级肛胎为可利用胚胎。年龄<35岁且第一次移植周期者最多移植2个胚胎;年龄)35岁或)2个治疗周期者最多移植3个胚胎。

1.4月玉胎移植 ① EmbryoGlL、组:取卵后第0天将1 mL EmbrvoGlue移植液放入37 0C ,6% C0,墙养箱内平衡过夜;第3天，将EmbrvoGlue移植液倒人仅凹fill一的内凹内，外凹倒人2 mL平衡过夜的G-2用于冲洗挑选的移植胚胎;将挑选的胚胎移人EiiilmvoGlue移植液内培养待移植;川一次性注射器抽取0. 3 mL的G-} , 连接移植管，弹走气泡，于显微镜下排空注射器后依次吸人少量空气、少量EmbrvoGlue移植液后再小心抽吸胚胎，尽量将胚胎放于正中位置，封管。② G-2 组:用G-2作为移植液，余同EmbrvoGlue组。

1.5随访 移植后给于黄体酮(浙江仙据制药公司)和(或) 戊酸雌二醇(Schering，法国)进行黄体支持;2周后验 Rl1和尿HCC，确定是否妊娠;HCG阳性者为生化妊娠，移植后4一5周行B超检查，见孕囊及心管搏动则诊断为临床妊娠。

1. 6统计学分析 采用sP>s 12. 0软件进行统计学分析，计量资料以v士/表示组间比较采用t检验;计数资料以 n(%)表示.组问比较采用厂检验。Y < 0. O5表不差异有统计学意义

2结果

2. 1内组患者基本资料比较 两绍患者在不孕类型(原发不孕和继发不孕)、 IVFiIC}I构成1.匕、不孕原因构成比(男性因素、女方因素、双方因素)方面比较差异均无统计学意义 (P>0. 0)

2. 2两组患者临床参数及妊娠结局比较 两组患者的年龄、不孕年限、既往失败周期数、子官内膜厚度、优质胚胎数和平均移植胚胎数比较，差异均无统计学意义(P > 0. OS ) } EmbrvoGlue组的临床奸娠率、胚胎种植率、多胎奸娠率均明显高于 G-2组差异有统计学意义(P < 0. OS ) ; EmbrvoGlue组的宫外孕发生率明显低于G _3组，差异有统计学意义(P<0. OS)

3讨论

随着科技进步，序贯培养基越来越多地被应用到辅助生殖技术中。蛋白质和透明质酸是人类胚胎培养体系的重要组成部分。在早期的研究3中，已经证实人类输卵管中含有大量蛋白质，蛋白质可以为细胞的体内外生长提供氨基酸和能量。透明质酸是由v_葡萄糖醛酸和N一乙醚葡萄糖胺组成的双糖单位玻尿酸，是一种就多糖，在哺乳类动物卵泡、输卵管、子宫液、宫颈蒲液和精浆中都存在透明质酸45」。高分子物质透明质酸在胚胎种植期的输卵管和子宫内含r-c增加有利于胚胎种植，其原理可能是透明质酸能使水分进人细胞间隙，并与蛋白质结合而形成蛋白凝胶，将细胞粘在一起，发挥正常的细胞代谢作用，保护细胞不受病原菌侵害增强免疫力。同时，透明质酸是增殖细胞和迁移细胞胞外基质的主要成分;尤其在胚胎组织中，透明质酸具有抗病毒和抗免疫排斥的作用，保护胚胎在种植过程中免受母体的免疫排斥6透明质酸还支持胚胎在培养液中的发育，促进胚胎种植Simot，等3的研究表明，透明质酸可以取代蛋白质作为人类胚胎移植液，并且取得了较好的临床结果EmbrvoGlue是 Vitrolife公司模仿人体输卵管和子宫内环境专门为胚胎移植而设计的移植液，含有透明质酸和支持胚胎在种植过程中所需要的营养成分Embrv oGlue移植液中含有透明质酸( 0. 5 mg/m工)和重组人白蛋自 (2.5 mg/mL)等营养物质。关于Embr}=oGlue移植液是否与胚胎的种植成功率有关，国外的研究结果不一致。有研究}.s」显示，EmbrvoGlue移植液可以提高胚胎的种植率和临床妊娠率;也有研究9’。·认为， Embrj}oGlue移植液对胚胎的种植率和临床妊娠率无影响。

为了探讨EmbryoGlue移植液是否与胚胎的种植成功率有关，本研究回顾性分析了500例接受不孕症治疗且进行胚胎移植的患者资料。通过统计学分析可以看出，两组患者的年龄、不孕年限、不孕类型 (原发不孕和继发不孕),IVF/ICSI构成比、不孕原因构成比例(男性因素、女方因素、双方囚素)及既往失败周期数的差异均无统计学意义。同时，为了避免胚胎质量和子宫内膜厚度对临床妊娠率的影响，本研究对两组患者的胚胎质量和子宫内膜厚度进行了比较，差异也均无统计学意义。本研究结果显示， EmbrvoGlue组患者的临床妊娠率和种植率明显高于 G-2组，与马水英等’“的研究结果相似，即EmbryoGlue 移植液可提高胚胎种植率和临床妊娠率。经分析认为，胚胎的种植过程即为母体针对异物发生的免疫系统激活，从而引发细胞因子参与的免疫排斥反应; 而透明质酸具有抗免疫排斥作用，同时还可与子宫分泌物共同增强胚胎在子宫的豁附和种植:m，从而提高了胚胎的种植率和临床妊娠率。

在本研究中，EmbrvoGlue组患者多胎妊娠率有所升高，可能原因是为了提高临床妊娠率人为移植了2一J个胚胎，而透明质酸可以促进细胞与细胞之间的粘连，从而提高了胚胎的种植率，而种植率的升高必然导致多胎的发生。多胎妊娠可导致奸娠期高血压、妊娠期糖尿病等疾病，同时还可能出现胎膜早破、低体质量儿、早产儿等为避免多胎的发生，需移植更少的胚胎，甚至单胚胎移植

IF-ET后的异位妊娠率高于自然妊娠中的异位妊娠率，原囚可能是在IVF-ET过程中，胚胎由宫腔内到输卵管再游走至宫腔，而在自然妊娠中胚胎仅由输卵管i旅走至宫腔，胚胎移植术人为地改变了胚胎的游走过程，同时一胚胎移植时人为控制移植管进人宫腔的深度，移植管作为异物刺激了子宫的收缩’这些操作为均可导致异位妊娠率升高。本研究中，EmbrvoGlue组的异位妊娠率为5. 2 c7c，明显低于(>-?组的14.3%，差异有统计学意义。分析其原因，透明质酸能使水分进人细胞问隙，并与蛋白质结合而形成蛋白凝胶，增强胚胎与子宫内膜之间的载附，从而抑制了胚胎在宫腔的游走，提高了胚胎在子宫内膜的种植概率，从而降低了异位奸娠的发生率。

综上所述，EmbrvoGlue是一种有效的移植液，在提高IV I'-ET临床妊娠率和种植率的同时，能起到降低宫外孕发生率的作用;但EmbrvoGlue移植液也导致r多胎率的升高，需要减少IVF-ET治疗中移植胚胎的数量

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