nm23在胃癌组织中的表达及临床意义

　　作者：任明　端木琰    作者单位：210029　江苏南京，江苏省中医院普外科，210029　江苏南京，南京中医药大学 　　【关键词】  胃肿瘤·基因，nm23

　　采用免疫组织化学SP法研究胃癌组织中nm23的表达情况，探讨其与胃癌患者的年龄、性别及临床分期、分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移的关系。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料　

　　收集南京中医药大学附属医院（江苏省中医院）2007年5月—2008年5月临床资料完整的胃癌常规石蜡包埋组织标本27例，男15例，女12例；年龄46～81岁，平均年龄65.4岁。TNM分期：Ⅰ期2例，Ⅱ期5例，Ⅲ期13例，Ⅳ期7例。病理组织学类型：高分化腺癌2例，中分化腺癌10例，低、未分化腺癌12例，黏液腺癌2例，印戒细胞癌1例。有淋巴结转移22例，无转移5例。

　　1.2　试剂及染色方法　

　　鼠抗人单克隆抗体nm23及SP免疫组织化学试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。蜡块4 μm连续切片，作免疫组织化学染色。染色步骤按SP试剂盒说明书进行，染色前均用微波修复组织抗原，用PBS代替一抗作阴性对照。

　　1.3　阳性结果判定　

　　nm23的阳性表达主要位于细胞质，有棕褐色或棕黄色着色为阳性，每张组织切片随机选取3个高倍视野，计数500个肿瘤细胞。染色结果判断参考Shimizu等［1］的方法，即先在高倍镜下为细胞染色程度评分，无着色为0，浅着色为1，深着色为2；再根据切片中染色范围评分，无着色为0，着色≤1/3为1，着色>1/3为2，弥漫着色为3，将上述两项得分相加，得分≥3为阳性。

　　1.4　统计学处理　

　　采用SPSS17.0统计软件包进行分析，采用χ2检验和Fisher确切概率法分析处理数据。P≤0.05为差异有统计学意义。

　　2　结果　　　　胃癌组织中nm23的表达与患者性别、年龄及组织学类型及淋巴结转移无关（P>0.05），而与胃癌的临床分期、分化、浸润深度有关（P<0.05）。27例胃癌组织中有14例（51.9%）nm23表达阳性，随临床分期的增加，阳性表达率下降，不同TNM分期差异有统计学意义（P<0.05）。随腺癌分化程度的降低，nm23表达率亦降低，差异有统计学意义（P<0.05）。肿瘤已侵及浆膜层者，其阳性表达率低于未侵犯浆膜者（P<0.05，表1，图1）。

　　3　讨论　　　　人类nm23基因定位于17号染色体长臂（17q21），1988年由美国国立研究院的Steeg从小鼠K1735黑色素瘤具有高转移和低转移潜能的细胞系中，应用差别筛选技术分离鉴定出nm23基因，并证明与肿瘤的转移抑制相关。nm23基因的编码产物为核苷二磷酸激酶的A、B亚基，相对分子质量为17×103，此酶参与体内的多种生物学过程，包括高能磷酸键的转移，催化γ-磷酸在二磷酸核苷和三磷酸核苷之间的转移，细胞内和细胞间信号传递，细胞骨架微管和纺锤体的形成［2］，调节细胞的生长、分化和凋亡，抑制肿瘤转移和发展，以及参与转录过程。nm23蛋白可改变GTP供给不足，微管聚合异常，纺锤体减数分裂障碍，导致细胞异倍体率增高。微管聚合异常，细胞不能维持正常形态结构而引起运动，参与肿瘤浸润转移和发生发展过程。研究表明，nm23蛋白在分化良好的肿瘤中高水平表达，nm23基因的表达水平与肿瘤的淋巴结转移呈负相关,与患者的生存期呈正相关，且在低转移的癌细胞株中mRNA水平高出高转移细胞株10倍之多，可作为评估肿瘤的转移和患者预后的指标［3-4］。　  　　本研究结果表明，nm23的阳性表达与胃癌患者的性别、年龄及组织学类型无关，而与其临床分期、分化、浸润深度有关，在分化高、分期早、浸润浅的胃癌组织中阳性表达率高，而在分化低、分期晚、浸润深的胃癌组织中表达率明显降低，表明nm23参与胃癌组织分化调节、癌组织浸润过程，并发挥重要的负性调控作用。但在淋巴结转移与否的病例中nm23表达差异无统计学意义，与相关文献报道不一致，可能与研究样本例数较少有关。近年来研究表明，nm23的抑癌作用可能是通过调节细胞信号传导与G蛋白活性和基因中G蛋白信号调控序列上调GSK-3β，靶向抑制Wnt信号通路，继而抑制β-catenin的表达，从而发挥转移抑制的作用［5］。　　　　通过近年来的各项研究结果，nm23在胃癌的分化增殖、浸润、分期，以及淋巴结转移及远处转移中起着非常重要的作用，对胃癌患者的诊断和判断预后方面均具有较高的意义。

【参考文献】　　[1] Shimizu M, Saitoh Y, Itoh H, et al. Immunohistochemical staining of H-ras oncogene product in normal, benign and malignant human pancreatic tissue[J]. Hum Pathol, 1990,21（6）:607-612.

　　[2] 赵茜，区穗芳，谢秀琴.P53及nm23在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系[J]. 中国热带医学，2007，7（5）：689-690.

　　[3] Kapitanovi S, Berkovi M, Radosevic S, et al. nm23-h1 expression and loss of heterozygosity in colon adenocarcinoma[J]. J Clin Pathol, 2004,57（12）:1312-1318.

　　[4] Nesi G, Palli D, Pernice LM, et al. Expression of nm23 gene in gastric Cancer is associated with a poor 5-year survival[J]. Anti-Cancer Res, 2001,21（5）:3643-3649.

　　[5] 王轶淳，孙明军，傅宝玉.胃癌组织中β-catenin及nm23H1的表达及其临床意义[J]. 世界华人消化杂志，2007，15（19）：2144-2147.