拉莫三嗪对脑出血大鼠脑组织含水量的影响
发表时间：2010-03-31 浏览次数：672次
作者：郭志松 邵换璋 作者单位：河南省人民医院中心ICU 郑州 450003 【摘要】 目的 研究拉莫三嗪(LTG)能否通过减轻脑水肿，发挥神经保护作用。方法 通过建立大鼠脑出血模型，采用干湿重法分别检测脑组织含水量的动态变化，以及LTG对脑水肿的干预情况。结果 手术组脑组织含水量在出血后12 h～1 d时增加，3 d时水肿达到峰值，7 d明显减轻，治疗组较手术组则明显减轻(P<0.05)，对照组在12 h～7 d变化不明显。结论 拉莫三嗪可以减轻实验性脑出血大鼠脑组织含水量。
【关键词】 拉莫三嗪 ;大鼠;脑出血;脑水肿
拉莫三嗪(LTG)主要用于难治性癫的治疗。其作用环节是抑制突触前膜兴奋性氨基酸谷氨酸的释放，抑制钠通道开放，稳定过度兴奋的神经元膜，减少Cl和H2O被动进人细胞，达到减轻脑水肿的作用。国内有报道LTG可通过降低神经细胞外液谷氨酸的浓度，减轻脑外伤后急性脑水肿，但对脑出血后脑水肿的治疗作用未见报道。本研究将观察拉莫三嗪(LTG)能否通过减轻脑水肿发挥神经保护作用。
1 资料与方法
1.1 实验动物和分组 健康成年雄性Wistar大鼠72只，体质量220～250 g，由郑州大学实验动物中心提供，合格证号：SYK200611。随机分为对照组8只，手术组32只，治疗组32只。后2组又分为12 h、1 d、3 d、7 d四个时间点进行脑组织含水量检测，每组每个时间点为8只大鼠。
1.2 脑出血模型的制作和成功的标志 大鼠经10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后，俯卧位固定于立体定位仪上，用微量进样器由股动脉抽取血液50 μl缓慢注入尾状核位置，留针15 min。 对照组注入等量生理盐水。动物麻醉清醒后，参照Zea Longa 等评分标准，累积1分以上为成功模型。
1.3 脑组织含水量的测定 实验大鼠断头取脑后，取进针道前约3 mm厚的脑组织。用电子天平先称取湿重，电热恒温培养干燥两用箱100℃烘烤48 h，再称取干重。利用脑组织含水量=(鲜质量-干质量)/鲜质量×100%进行计算。
1.4 统计学方法 所有数据以均数±标准差表示组间比较用方差分析, 数据处理采用SPSS 12.0软件进行分析。α=0.05为检验水准。
2 结果
2.1 实验动物的一般情况 在脑出血模型中，有3只大鼠死亡，其中4只死于麻醉意外，2只死于出血波及颅底，由备用动物补充。脑出血组动物麻醉清醒后均出现不同程度的精神萎靡，反应迟钝，自洁能力下降，进食减少。对照组大鼠精神恢复，反应及进食正常。脑出血大鼠于术后6 h即可观察到其行为学改变，均出现较明显左侧肢体偏瘫、旋转爬行或拖步行走，神经缺损体征以造模后12～24 h最为明显，72 h后分别出现不同程度的改善。对照组未出现上述神经缺损症状。
2.2 脑组织含水量变化 手术组脑组织含水量在出血后12 h开始增加，3 d时水肿达到峰值，7 d有所减轻，治疗组与手术组比较各时间点的脑组织含水量均相应降低，差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组在12 h～7 d变化不明显。详见表1。表1 各时间点大鼠脑组织含水量的变化 与对照组比较，*P<0.05;与手术组比较，#P<0.05
3 讨论
拉莫三嗪的化学结构为3，5二氨基6(2，3二氯苯基)1，2，4三丫嗪，目前主要用于难治性癫的治疗。其作用环节是抑制突触前膜兴奋性氨基酸谷氨酸的释放，抑制钠通道开放，稳定过度兴奋的神经元膜，减少Cl和H2O被动进人细胞内达到减轻脑水肿的作用[1]。
国内有报道LTG可通过降低神经细胞外液谷氨酸的浓度，减轻脑外伤后急性脑水肿[2]，但对脑出血后脑水肿的治疗作用未见报道。本研究发现脑出血后手术组脑组织含水量在出血后12 h开始增加，3 d时水肿达到峰值，7 d有所减轻，治疗组与手术组比较各时间点的脑组织含水量均相应降低，差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组在12 h～7 d变化不明显。认为其可能机制是：(1)作用于电压依赖钠通道，抑制突触前膜谷氨酸的释放，从而使NR1激活减少，细胞损害减轻。本实验中可见NR1在治疗组的阳性表达明显减少，细胞损害减轻，与Bather[3]， Pisani[4]的研究一致。(2)作用于电压门控性钙通道(VGCCs)参与神经元兴奋性和传导性的调节，并通过钙离子浓度的变化影响第二信使系统。VGCCs还参与细胞毒性作用，通过激活一系列酶活动，产生细胞损害。LTG可作用于VGCCs调节神经递质释放，降低钙调性细胞毒性而发挥神经保护作用。此外对离体脑皮层突触小体的研究中，发现LTG通过减少突触前膜钙离子内流，以浓度依赖的方式，抑制由4AP诱导的皮质，纹状体谷氨酸盐的释放。还能减少因膜去极化产生的细胞内游离钙离子浓度升高[5]。
该研究提示拉莫三嗪可以减轻实验脑出血大鼠脑组织含水量，早期应用拉莫三嗪进行治疗可能作为预防和减轻脑损伤的有效途径。
【参考文献】 [1] Peck AW. Clinical pharmacology of lamotrigine[J]. Epilepsia, 1991, 32: 9l2.
[2] 程员. 拉莫三嗪治疗脑外伤后脑水肿的实验研究[J].中华创伤志,1998,14：209211.
[3] Pisani F,Pedale S， Macaione V.Neuroprotective effect of lamotrigine and remacemide on excitotoxicity induced by giutamate againist in isolated chick retina[J].Exp Neurol, 2001, 170: 162170.
[4] Wang SJ, Tsai JJ, Gean PW. Lamotrigine inhibits tetruethylammonium induced synaptic plasticity in the rat amygdala[J]. Neuroscience, 1997, 81: 667671.
[5] Wang SJ, Sihra TS, Gean PW. Lamotrigine inhibition of glutamate release from isolated cerebrocotical nerve teminals by amppression of voltageactivated calcium channel activity[J].
