新疆哈萨克族、汉族食管癌组织中Fas、Bax的表达及其临床意义
发表时间：2010-08-11 浏览次数：560次
作者：李桂红 作者单位：新疆医科大学基础医学院病理解剖学教研室， 附属肿瘤医院胸外科， 新疆乌鲁木齐830011
【摘要】 目的： 探讨凋亡相关基因Fas、Bax在新疆哈萨克族(哈族)、汉族食管鳞状上皮细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化LSAB法及原位凋亡Tunel试剂盒检测86例(哈族53例，汉族33例)食管鳞癌和10例癌旁远端正常食管组织中Fas、Bax蛋白的表达及鳞癌细胞的凋亡。结果：(1)Fas、Bax蛋白在86例食管鳞癌中的阳性表达率分别为89.5%(77/86)、41.9%(36/86)，而在远端正常食管组织中的阳性表达率分别为70.0%(7/10)、50.0%(5/10)。(2)哈族与汉族食管鳞癌组织中的Fas、Bax表达及细胞凋亡检测差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Fas、Bax在不同分化程度的食管鳞癌组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。(4)Fas、Bax在淋巴结转移和未转移病例间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论：Fas、Bax的表达与食管鳞癌的分化有关，Fas、Bax的表达可用于判断食管癌的恶性程度以及推断临床预后。
【关键词】 食管鳞癌 Fas Bax
Study on the clinical significance and the expression of Fas and Bax in esophageal carcinoma tissue in Kazak and Han nationality in Xinjiang
LI Gui-hong, GAO Sheng-li, PU Hong-wei
(Department of Pathology, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)
Abstract: Objective: To study on the expression and the clinical significance of Fas and Bax in esophageal squamous carcinoma tissues in Kazak and Han nationnality in Xinjiang. Method: Eighty six tissues with esophageal squamous-cell carcinoma and 10 normal tumor-adjacent tissues were examined for Fas and Bax by immunohistochemisry. Result: (1)The positive frequency of expression of Fas, Bax in 86 tissues with esophageal squamous-cell carcinoma were 89.5%(77/86), 41.9%(36/86)respectively. And the expression of those in normal tumor-adjacent tissues were 70.0%(7/10), 50.0%(5/10). (2) No statistic significance of expression of Fas, Bax was found among different ethnic patients in Xinjiang (P>0.05). (3) There were statistic significance among varing degrees of differentiation (P<0.05). (4) There were no statistic significance between LMN and non-LMN (P>0.05). Conclusion: (1) It suggested that the expressions of Fas, Bax are correlated with the degree of differentiation of esophageal squamous-cell carcinoma. (2) The expression of Fas, Bax could be used to assessing the degree of malignancy and predicting the clinical prognosis.
Key words: esophageal carcinoma; Fas; Bax
新疆是食管癌高发区域之一，据1987年统计结果，部分地区如塔城托里县哈萨克族(哈族)食管癌年平均死亡率高达155.9/10万，远远高于全国平均水平(14.95/10万)，在各民族中，哈萨克族食管癌死亡率最高，达66.88/10万，远高于新疆的其它民族[1]。本研究应用免疫组化法对86例新疆哈族、汉族食管鳞癌凋亡相关基因Fas、Bax的表达进行检测，探讨其在食管鳞癌发生、发展中的生物学意义，为进一步阐明食管癌致病机制，实现食管癌的早期诊治打下基础。
1材料与方法
1.1一般资料新疆医科大学第一附属医院病理科1993~2003年手术切除的均经病理确诊的食管鳞癌石蜡包埋组织86例，其中哈族53例，汉族33例，年龄41～78岁，平均57 岁。男性 61 例，女性25 例。鳞癌组织高分化18例，中分化51例，低分化17例。其中伴淋巴结转移食管癌33例，无淋巴结转移食管癌53例。所有标本均经10%福尔马林固定后常规石蜡包埋。以手术切除标本的远端正常食管组织作为对照。
1.2试剂和实验方法Fas、Bax均为兔抗人多克隆抗体(产品编号为RAB-0122、RAB-0254)均购自福州迈新生物技术公司。 研究用蜡块以4~5 μm厚度连续切片5张，贴片后置55℃烤箱中3 h后取出备用。免疫组化染色采用LSAB法，具体步骤按试剂盒说明进行。
1.3结果判定Bax阳性结果为癌细胞胞浆内出现棕黄色颗粒，Fas阳性结果为癌细胞胞膜和胞浆上出现棕黄色颗粒。
1.4统计学处理采用PEMS软件进行χ2检验及校正χ2检验，检验水准α=0.05。
2结果
2.1哈族与汉族食管鳞癌组织中Fas、Bax的表达哈族与汉族食管鳞癌组织中Fas、Bax的表达差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。
表1哈族与汉族食管鳞癌组织中Fas、Bax的表达(略)
2.2不同分化程度食管鳞癌组织中Fas、Bax的表达Fas、Bax在不同分化程度食管鳞癌组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)， 且表达随着分化程度的降低而减少(表2)。
表2不同分化程度食管鳞癌组织中Fas、Bax的表达(略)
2.3淋巴结转移与Fas、Bax表达的关系Fas、Bax在淋巴结转移和未转移组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05),见表3。
表3淋巴结转移与Fas、Bax表达的关系(略)
3讨论
研究表明，细胞凋亡是细胞内发生的一系列有序受控的连锁反应，有多种基因蛋白产物参与了细胞凋亡过程[2]。已知细胞凋亡有两条途径：一是外源性凋亡途径，即通过肿瘤坏死因子受体(TNFR)家族成员(如 TNFR-1、Fas)参与的通过Caspase-8活化引起细胞凋亡的途径。二是内源性凋亡途径，即由Bcl-2家族蛋白介导的线粒体通透性的改变而释放细胞色素C，并活化Caspase-9引起凋亡的途径，两条途径最后均通过激活下游效应蛋白Caspase-3 和Caspase-7使细胞凋亡[3~5]。Fas、Bax作为凋亡诱导基因，可分别通过上述两条途径诱导细胞的凋亡。Bcl-2家族同源蛋白按结构功能不同分前凋亡蛋白和抗凋亡蛋白，前凋亡蛋白包括Bax、Bcl-XS、Bak等，抗凋亡蛋白包括Bcl-2、Bcl-XL、Mcl-1等。前凋亡蛋白Bax过表达则导致线粒体跨膜电位丢失及细胞色素C释放，而启动凋亡[6,7]。促凋亡与抗凋亡二聚物的比率在决定细胞抵抗凋亡的机制中有重要作用。关于Bcl-2和Bax表达水平的多样性分析表明，抗凋亡的程度与未结合 Bcl-2 的数量有关，而和Bcl-2-Bax异二聚物的数量无关[8]。本研究显示，Bax 的表达在汉族和哈族之间无显著性差异，表明该基因的表达无民族间基因背景差异，而在不同分化程度的食管鳞癌组织中Bax 的表达存在显著性差异，随着分化程度的降低而下调，提示 Bax表达的缺失与食管鳞癌分化不良有关。Fas是细胞凋亡的外源性凋亡途径的始动蛋白之一，以膜受体的形式存在[9，10]，通过转录水平的不同拼接产生可溶性的sFas分子，对膜受体Fas介导的细胞凋亡产生抑制性调节作用。Shimonishi等[11]发现结肠癌细胞SW620和HT29表达Fas，但是抵抗Fas介导的凋亡。本研究发现Fas的表达在汉族和哈族之间无显著性差异，表明该基因的表达无民族间基因背景差异，而在不同分化程度的食管鳞癌组织中Fas 的表达存在显著性差异，且也随分化程度的降低而相应下调， 提示Fas表达的缺失与食管鳞癌分化不良有关。本研究还发现Fas蛋白在食管鳞癌中的阳性表达率高达89.5%(77/86)。作为一种促凋亡基因，如此高表达而不能进行由Fas所介导的细胞凋亡，提示可能存在另外的基因或途径调节Fas系统所引起的生物学作用，其机制有待今后进一步的研究。
【参考文献】
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