大面积烧伤患者外周血T淋巴细胞亚群的研究
发表时间：2011-04-11 浏览次数：645次
作者：许坤 作者单位：解放军第251医院,河北 张家口 075000
【摘要】 目的：探讨大面积烧伤患者T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法：采用直接免疫荧光法，应用流式细胞仪，检测45例烧伤患者及15例健康人外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的数值及CD4+/CD8+比值。结果：与正常对照组比较，CD4+细胞数明显降低(P<0.05);CD4+/CD8+比值明显降低(P<0.05)。结论： 烧伤患者外周血中的T淋巴细胞亚群在发病机制中起重要作用。
【关键词】 烧伤患者 T淋巴细胞亚群 流式细胞技术
Study on T Lymphocyte Subsets of Large Area Burn Patients
XU Kun, ZHANG Li， ZHANG Jingran
(The 251st Hospital of PLA, Zhangjiakou,Hebei 075000,China)
Abstract： Objective Large area of burns patients T lymphocyte subsets change and its clinical significance.Methods Using direct immun of luorescence， the value of CD3+T cells、CD4+T cells、CD8+T cells and CD4+/CD8+ in 45 cases of burn patients and 15 healthy people’s Peripheral blood were detected by FCM.Results With the normal control group, CD4+cells decreased significantly (P<0.05); CD4+/CD8+ ratio decreased significantly(P<0.05).Conclusion Burn patients with the T lymphocyte subsets in the pathogenesis of play an important role.
Key words：Burn patients;T lymphocyte;Flow cytomety
烧伤可引起机体免疫功能紊乱，从而导致机体免疫力、抵抗力的下降和有关疾病的发生[1]。淋巴细胞是执行免疫功能的主要细胞亚群，为探讨烧伤患者机体免疫功能紊乱机制，我们应用流式细胞仪检测45例烧伤患者外周血T细胞亚群并与正常人对照，以探讨大面积烧伤患者T细胞亚群的特点。
1 资料与方法
1.1 临床资料
对45例大面积烧伤住院患者 ，Ⅱ度(58.4±4.6)%[其中浅Ⅱ度(26.3±2.7)%，深Ⅱ度(39.5±3.5)%]，Ⅲ度烧伤度(6.5±2.5)%，其中男性32例，女性13例，年龄4岁～65岁，平均年龄(38.54±3.5)岁。其中开水烫伤20例，煤气爆炸12例，火焰烧伤13例。受伤前后均未使用免疫系统抑制剂;分别于伤后第1天、第7天、第14天及第21天抽取外周血，并与15例健康献血员做对照组。
1.2 主要试剂和仪器
双色标记单抗CD3+、CD4+分别与FITC、PE荧光素结合;含beads的TrueCount管;CaliBRITEbeads; FACS溶血素(均为美国BD公司产品)。FACSCalibur流式细胞仪(美国BD公司)。
1.3 实验方法
标本处理：抽患者外周血2 ml,用肝素钠抗凝管保存，6 h内分析;向TrueCount管中分别加入20 μl抗体和50 μl的抗凝全血,振荡混匀3 s，避光放置15 min;加入FACS(1X)溶血素2 ml，充分混匀，室温避光10 min;1 000 r/min离心5 min,弃上清;加入2 ml PBS洗一次;800 r/min离心5 min,弃上清;流式细胞仪上机检测。数据获取与分析：使用CaliBRITE 标准微球、FACSComp软件调节FACS Calibur流式细胞仪PMT电压、荧光补偿、灵敏度，应用SimulSET分析软件对处理好的标本进行CD3+、CD4+、CD8+相对计数。
1.4 统计学分析
采用SPSS 8.0统计软件，所有数据以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验进行数据分析。
2 结果
患者伤后第1天、第7天、第14天、第21天的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值与健康对照组的值见表1。表1 烧伤后T淋巴细胞亚群检测结果比较(略)注：与正常对照组比较，*P<0.05。
烧伤患者外周血T细胞亚群检测结果见表1:烧伤患者与正常组比较CD4+细胞数明显降低(P<0.05);CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。
3 讨论
正常免疫应答过程依赖于各种免疫细胞，特别是各T细胞亚群之间的相互协作和相互制约。若某一T细胞亚群的数量和功能发生异常，机制就出现免疫紊乱，并发生一系列病理变化。T细胞亚群是一群具有特殊标志的从胸腺中输出的细胞，主要执行的是细胞免疫的效应功能和免疫调节功能，鉴于表现型，将标志为辅助/诱导T细胞亚群之间有一定比例，以保持适度的免疫应答，如果T细胞亚群的比例失调，则导致细胞免疫功能紊乱。目前，比值已成为监测人体细胞免疫功能、反映机体免疫状态的指标。
本文观察了45例大面积烧伤患者不同时间的T淋巴细胞亚群的变化。结果显示：CD3+、CD4+伤后第1天起到第7天、第14天、第21天逐渐下降与对照组比较有差异(P<0.05)。CD8+伤后第1天起到第7天、第14天、第21天逐渐升高与对照组比较有差异(P<0.01)。CD4+/CD8+出现倒置现象。
CD4+为辅助/诱导T细胞亚群，CD8+为抑制/细胞毒T细胞亚群，CD4+/CD8+的比值目前已成为监视机体免疫力功能，反映机体免疫力状态的主要指标之一。本资料结果，CD4+/CD8+的比值伤后明显低于对照组，说明烧伤机体免疫功能是缺陷的，而且出现时间较早[2]。发现患者机体内的比值下降，导致细胞功能紊乱，T淋巴细胞和T淋巴细胞的不同比例的变化同时决定两者比值的变化，综合发现，CD4+的下降和CD8+的上升，可能是构成机体免疫功能紊乱的主要原因。因此，为临床揭示了大面积烧伤患者伤后细胞免疫变化规律，给治疗伤后免疫低下提供理论依据。
【参考文献】
[1]HousbroughJ F, Zapatasirvent R L，Peterson V M. Immunomodulation following burn injury[J].Surg Clin Nor Am,1987,67:6992.
[2]詹建华，李国辉，刘德伍.烧伤患者外周血T淋巴细胞亚群变化动态观察[J].江西医学院学报，2000，40(1)：8788.
