老年原发性肝癌中dysadherin和Ecad表达的临床病理学意义

　　作者：刘丹丹 作者单位：310053浙江省杭州市，浙江医学高等专科学校病理教研室

　　【摘要】 目的 探讨抗黏附素(dysadherin)和上皮钙黏蛋白(Ecad)在老年原发性肝癌中表达的临床病理学意义。 方法 应用免疫组化SP技术，检测60例老年肝癌组织中dysadherin和Ecad的表达水平。 结果 dysadherin和Ecad蛋白的表达呈负相关关系(r=-0.768，P<0.01)，前者与肝癌的肿块大小、Edmondson分级、TNM分期、肿瘤包膜有显著相关(r值分别为0.627、0.453、0.717、0.768，P<0.05或P<0.01)，后者与肝癌的Edmondson分级、TNM分期、肿瘤包膜、淋巴结转移以及门静脉癌栓等都显著相关(r值分别为0.402、0.821、0.749、0.355、0.767，P<0.01或P<0.05)。 结论 dysadherin的表达可能是老年肝癌预后的重要指征。与Ecad联合分析，有助于从多方面了解患者的预后信息。

　　【关键词】 原发性肝癌,抗黏附素,上皮,钙黏蛋白

　　【Abstract】　Objective To explore the clinicopathological significance of dysadherin and Ecad expression in primary hepatic cacinomas. Methods Immunohistochemical SP technique was used to detect the expression of dysadherin and Ecad in 60 elderly cases of primary hepatic carcinomas. Results Dysadherin expression was negatively correlated with Ecad,and the former was closely related with tumor size,Edmondson grade,TNM stage and tumor encapsulation(P<0.01 or P<0.05),and the latter was related to Edmondson grade,TNM stage,tumor encapsulation,lymph node metastasis and portal vein embolus(P<0.01 or P<0.05). Conclusions Dysadherin expression may be an important prognostic indicator of hepatic cacinoma in the elderly. It can be more useful to know the prognostic information of hepatic carcinoma patients from the combined analysis with Ecad.

　　【Key　words】 primary hepatic carcinoma; dysadherin; Ecad

　　抗黏附素(dysadherin)是一种新发现的肿瘤相关的细胞膜糖蛋白[1]，可下调上皮钙黏蛋白(Ecad)的表达，降低细胞间的黏附性能，促进肿瘤转移。随着我国人口的老龄化趋势，老年肝癌患者比例有所上升[2]。我们通过检测60例老年原发性肝癌标本中dysadherin和Ecad的表达，探讨它们与原发性肝癌侵袭转移的关系及其对老年患者临床预后的意义。

　　1 材料与方法

　　1.1 标本 收集本校教学医院1995～2005年手术切除的老年原发性肝癌标本60例，标本均经临床病理学证实。其中男51例，女9例。年龄60～76岁，平均(68.1±5.3)岁。

　　1.2 试剂 羊抗人dysadherin多克隆抗体为Santa Cruz公司产品，即用型Ecad单克隆抗体、SP免疫组化试剂盒和DAB显色剂均购自福州迈新生物技术公司。

　　1.3 结果判定 以肿瘤组织附近内皮细胞的染色强度为标准，以肿瘤细胞膜区域出现强度相当的棕黄色颗粒判断为阳性，进行半定量分析。按阳性细胞数的不同，将dysadherin表达分3个等级:0～20%为1+，21%～50%为2+，51%～100%为3+。Ecad表达分为2个等级：81%～100%阳性为持续表达(+)，≤80%阳性为表达降低(-)。

　　1.4 统计学处理 采用SPSS 11.5统计软件，对数据进行χ2检验和等级相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 dysadherin在肝癌中的表达 dysadherin阳性染色可见于肿瘤细胞、淋巴细胞和内皮细胞。根据阳性癌细胞的比例，本实验中25例为dysadherin表达1+，19例为dysadherin表达2+，16例为dysadherin表达3+。dysadherin和各项临床病理学因素的关系研究表明，其表达的阳性程度和肝癌的肿块大小(P<0.01)、Edmondson分级(P<0.05)、TNM分期(P<0.01)、肿瘤包膜完整与否(P<0.01)有显著相关性。见表1。表1 肝癌病理学参数和Ecad、dysadherin蛋白表达的关系(注：相同病理学参数中不同分组比较，*P<0.05，**P<0.01

　　2.2 Ecad在肝癌中的表达 Ecad阳性染色可见于正常胆管上皮细胞和大部分癌细胞上。根据阳性细胞的比例，Ecad持续表达(+)的为18例，表达降低(-)的为42例。Ecad的降低表达和肝癌的Edmondson分级(P<0.05)、TNM分期(P<0.01)、肿瘤包膜完整与否(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)以及门静脉癌栓(P<0.01 )都有显著相关，与患者的性别以及肿瘤的大小、组织学类型无关(P>0.05)。见表1。

　　2.3 Ecad和dysdherin表达的关系 dysadherin表达强度为1+、2+和3+的标本中，Ecad降低表达的分别为11例、14例和17例。两者呈明显的负相关关系(r=-0.768，P<0.01)。

　　3 讨论

　　细胞细胞间黏附系统功能的失调在肿瘤的进展和转移中有重要作用。Ecad的表达下降或活性丧失是细胞间黏附系统功能降低的关键因素。本研究中70%的标本中可见Ecad的表达下降，高于其他研究者的结论。这一分歧可能和我们专门选取了≥60岁的老年人群有一定关系。但Ecad和肝癌各项病理学参数之间的关系与以前的研究相一致，是患者不良预后的一个独立指标。

　　dysadheirn主要定位于癌细胞的细胞膜上，在癌巢中的表达具有明显的异质性。尽管在一部分分化好的癌细胞上也可见有dysadherin的阳性表达，但分化程度较低、单个分离的肿瘤细胞和浸润性生长的癌巢中的表达强度明显高于分化好的癌巢。另外，正常的肝细胞和胆管上皮细胞表达均为阴性，而正常的淋巴细胞和内皮细胞dysadherin染色则为阳性。因此，我们将这2种细胞作为内参来判断肿瘤细胞染色的阳性与否。研究表明，dysadherin的升高表达和Ecad的降低表达和肝癌分级、分期、浸润性生长方式等都有显著关系。两者呈明显的负相关关系，可能是dysadherin以转录后调控的方式下调Ecad的表达所致。本次免疫组化试验中，dysadherin的表达升高并伴有Ecad的表达降低的患者预后最差，相反dysadherin表达降低并伴有Ecad的表达升高的患者预后最好。可见两者联合检测，更有助于从多方面了解和判断肝癌的恶性程度和患者的预后信息。目前国内外针对dysadherin和肝癌关系的研究未见明确报道。但Hirohashi研究小组的成员现已在结肠直肠癌、胃硬癌、胰腺导管腺癌、宫颈鳞癌、甲状腺癌、皮肤恶性黑色素肿瘤等多种肿瘤组织检测到dysadherin的表达升高。

　　dysadherin的表达水平和肿瘤细胞活性有关系[3]。dysadherin可调节肌动蛋白结构，刺激细胞活性，直接提高肿瘤细胞的转移潜能。根据dysadherin和免疫球蛋白Fc片段相连接的胞外段二聚体蛋白的一个碳水化合物成分的直接分析，Tsuiji等[4]推测肿瘤细胞dysadherin 0端的异常糖基化，可抑制dysadherin的稳定表达，引起Ecad表达的上调，最后导致细胞黏附性的增加，那么通过一些针对该碳水化合物的方法来调节dysadherin的表达可能是将来肿瘤治疗的新策略。

　　【参考文献】

　　[1] Ino Y，Gotoh M，Sakamoto M. et al. Dysadherin，a cancerassociated cell membrane glycoprotein，downregulates Ecadherin and promotes metastasis[J]. Proc Natl Acad Sci USA，2002,99(1):365370.

　　[2] 王志军，刘凤永，王茂强.老年肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞术[J].实用老年医学，2006，20(3)：198200.

　　[3] Shimamura T，Yasuda J，Ino Y，et al. Dysadherin expression facilitates cell motility and metastatic potential of human pancreatic cancer cells[J]. Cancer Res，2004,64(19):69896995.

　　[4] Tsuiji H，Takasaki S，Sakamoto M，et al. Aberrant Oglycosylation inhibits stable expression of dysadherin，a carcinomaassociated antigen，and facilitates cellcell adhesion[J]. Glycobiology，2003,13(7):521527.