金黄色葡萄球菌食物中毒病原检测方法比较

细菌性食物中毒中在国内外比较常见的食物中毒病原为金黄色葡萄球菌，在我国细菌性食物中毒中由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒占25%，在国外中毒率则更高可达50%[1]。因此日常中的加热对于被金黄色葡萄球菌污染过的食物中产生耐热的肠毒素并无损害，对人类容易诱发食源性疾病的发生。因此对于食物中毒的患者采用快速、灵敏的病原菌检测方法在临床上起到关键的作用。为了更深入的研究分析，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择2013年11月～2014年1月在我区治疗的44例金黄色葡萄球菌食物中毒患者，分为试验组与对照组，每组22 例。对照组男12例，女10例，年龄9～65岁，平均(30.2±4.3)岁。试验组男11例，女11例，年龄7～71岁，平均(34.2±3.7)岁。两组患者进行肠毒素检测均确诊为C型肠毒素中毒，并且两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法：试验组采用荧光PCR仪检测患者的呕吐物，主要的原理为在将荧光基团放入PCR反应体系中，实时检测PCR扩增反应中的每一个循环扩增产物量的变化根据荧光信号的变化，定量起始模板DNA;对照组的患者采用金黄色葡萄球菌分离培养法检测患者的呕吐物，主要步骤为：取25 g标本放入225 ml灭菌的生理盐水，均匀混合后接种5 ml的液体在(36±1)℃下的7.5%氯化钠肉汤增菌24 h，然后在转种在(36±1)℃的BP琼脂培养24 h 后，最后进行镜检、血浆凝固酶试验、甘露醇发酵试验等。

1.3 观察指标：观察两组患者的呕吐物经过检测后呈阳性的人数。根据金黄色葡萄球菌DNA定性检测试剂盒上说明，将检测结果规定为：阳性：0

1.4 统计学处理：使用SPSS 17.0对各项资料进行统计、分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 比较两组患者呕吐物的检测效果：两组患者呕吐物经检测后，试验组检测呈阳性率(100%)明显高于对照组检测呈阳性率(72.73%)，差异有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

2.2 比较两组患者呕吐物的检测时间：试验组患者呕吐物检测的时间为4 h，而对照组患者呕吐物检测的时间为4 d，试验组患者呕吐物检测时间明显低于对照组患者呕吐物检测时间，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

采用荧光PCR方法检测金黄色葡萄球菌食物中毒效果较显著，检测呈阳性率结果相当高可达100%。本研究结果显示：两组患者呕吐物经检测后，试验组检测呈阳性率(100%)明显高于对照组检测呈阳性率(72.73%);试验组患者呕吐物检测的时间为4 h，而对照组患者呕吐物检测的时间为4 d，试验组患者呕吐物检测时间明显低于对照组患者呕吐物检测时间，差异有统计学意义(P<0.05)。分析其原因，对于金黄色葡萄球菌食物中毒病原菌的检测在我国较常用的方法为金黄色葡萄球菌分离培养，但需要一系列对标本进行增菌、分离培养、生化鉴定等步骤，在经过这些步骤时会使标本中的部分成分丢失，有较低的灵敏度，影响最后的检测效果[2]。并且还要经过镜检、血浆凝固酶实验、甘露醇发酵实验等繁琐的操作，消耗较长的时间。而荧光 PCR检测方法能使这些缺点得到弥补，有较简单的操作、有较高的灵敏度，检测用时较短[3]。并且对于无活菌及较低含菌量的用药后的患者标本及对可疑食品中毒已经加热杀菌后的检测效果更显著。由于荧光PCR检测方法的敏感性较高，外环境金黄色葡萄球菌污染会直接影响到标本的检测效果，会产生假阳性的现象，会使检测结果偏高。所以对于检测金黄色葡萄球菌的检测最好的方法是结合两者的优点。综上所述，对于检测金黄色葡萄球菌食物中毒病原菌采用荧光PCR检测方法效果较显著，在临床上可以作为初筛、辅助的检测手段，为临床上的诊断指明方向，节约时间，为治疗提供足够的时间，值得深入研究。

4 参考文献

[1] 何冬梅,朱海明,赖蔚苳,等.广东省食物中毒暴发疫情中沙门菌和金黄色葡萄球菌自动化核糖体基因分型研究[J].中华流行病学杂志,2011,32(9):918.

[2] 姜秀杰,孙 伟,王广廷,等.金黄色葡萄球菌食物中毒病原检测及方法比较[J].中国中医药现代远程教育,2009,7(7):48.

[3] 唐 军.中山市古镇某幼儿园金黄色葡萄球菌食物中毒事件流行病学调查报告[J].中国社区医师医学专业,2012,14(25):379.

[收稿日期：2014-05-24 编校：徐强]