复发性乳腺癌化疗药物敏感性的体外实验
发表时间：2010-03-02 浏览次数：519次
作者：李治 作者单位：430022 武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院乳腺甲状腺外科 【关键词】 乳腺癌 肿瘤复发 多药耐药 体外研究
虽然近十年来乳腺癌的综合治疗效果有显著提高，但是对于复发的患者，化疗多药耐药性的存在使临床医生在制定解救化疗方案时依然存在困难。
1 资料与方法
1.1 临床资料
乳腺癌组织标本来自我院2003年5月～2006年12月经病理证实的乳腺癌患者，均为女性，年龄30～71岁（平均48.8岁）。其中原发性乳腺癌患者（未接受过化疗）71例，复发性乳腺癌患者（均接受过含有蒽环类和(或)紫杉类药物的化疗方案）29例。
长春瑞滨（盖诺）由豪森制药公司提供，紫杉醇（特素）、多西他赛（艾素）和羟基喜树碱由恒瑞公司提供，表阿霉素、阿霉素以及其他药物由辉瑞公司提供。
1.2 原代乳腺癌细胞的分离培养与化疗药物敏感性测定
无菌条件下获取乳腺癌组织后，参照文献[1]的方法获得乳腺细胞微球，移入96孔板用无血清培养基，37℃和5％CO2下培养。当原代乳腺癌细胞铺满96孔板底70％～80％时，用MTT法测定不同化疗药物的细胞杀伤率，每组设3个复孔。
细胞杀伤率（％）＝[1－（实验组OD值－阴性组OD值）/（阳性组OD值－阴性组OD值）]×100％。
疗效判定标准：IC50＜0.5倍血浆药物浓度（plasma pharmacal concentration，PPC）,IC90＜1.0PPC为高度敏感；IC50＞0.5 PPC,IC90＜1.0 PPC为中度敏感；IC50＜0.5 PPC,IC90＞1.0 PPC为低度敏感；IC50＞0.5 PPC,IC90＞1.0 PPC为耐药。
1.3 统计方法
应用SPSS11.0软件进行配对t检验。
2 结果
对乳腺癌原代细胞的体外药物敏感性检测结果，见图1。
1～12分别为5Fu、阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、多西他赛、吉西他滨、羟基喜树碱、长春新碱、长春瑞滨、丝裂霉素、卡铂、顺铂
图1 乳腺癌原代细胞体外药物敏感性检测结果
3 讨论
耐药能力的获得是导致化疗失败以及肿瘤复发，影响乳腺癌患者预后的重要原因[2],同时与肿瘤发展过程中某些基因突变的累积有关[3,4]。并且随着化疗后肿瘤的复发和进展，相关耐药基因突变的累加会导致肿瘤耐药能力的不断增强和肿瘤趋于难治。
由于化疗方案的选择主要依赖于临床医生的经验，缺乏客观有效的指导，所以应用肿瘤原代细胞药敏实验指导临床化疗方案的设计，一直是临床医生渴望得到的重要技术。我们的研究显示用胶原酶消化法能够获取足够数量和活性良好的肿瘤原代细胞，采用特殊培养基的肿瘤细胞原代培养能够很好地确保肿瘤细胞的纯度和增殖活性，此时对原代培养的肿瘤细胞进行化疗药物敏感性检测可以直接反映化疗药物对肿瘤细胞的作用效果[5]。
我们的研究结果显示对于原发性乳腺癌患者，蒽环类、紫杉类药物以及吉西他滨比其他化疗药物有更好的疗效（P＜0.01），提示蒽环类、紫杉类药物以及吉西他滨是原发乳腺癌患者化疗理想的一线药物,而对于已使用过蒽环类和(或)紫杉类药物化疗的复发性乳腺癌患者，蒽环类、紫杉类药物的疗效会明显下降（P＜0.01），吉西他滨、羟基喜树碱以及长春瑞滨三种药物的疗效则没有明显下降并且优于其它药物（P＜0.01），提示对于该类患者，含有吉西他滨、羟基喜树碱、长春瑞滨的化疗方案可能是临床医师较好的选择。
【参考文献】 ［1］ Charlotte K,Tony C,Min Wu,et al.Reconstruction of functionally normal and malignant human breast tissues in mice［J］.PNAS,2004,101(14):49664971.
［2］ Yoshikawa M,Ito A,Ishikawa T,et al.Drug resistance mediated by ABC transporters［J］.Gan To Kagaku Ryoho,2004,31(1):16.
［3］ Moliterni A,Me'nard S,Valagussa P,et al.HER2 Overexpression and Doxorubicinin Adjuvant Chemotherapy for Resectable Breast Cancer［J］.J Clin Oncol,2003,21(3):458462.
［4］ Ayers M,Symmans WF,Stec J,et al.Gene Expression Profiles Predict Complete Pathologic Response to Neoadjuvant Paclitaxel and Fluorouracil,Doxorubicin,and Cyclophosphamide Chemotherapy in Breast Cancer［J］.J Clin Oncol,2004,22(12):22842293.
［5］ Xu JM,Song ST,Tang ZM,et al.Predictive chemotherapy of advanced breast cancer directed by MTT assay in vitro［J］.Breast Cancer Res Treat,1999,53(1):7785.
