bclxl在膀胱癌组织中的表达及其与细胞凋亡之间的关系

作者:谢庆祥,林吓聪, 张闽峰

【关键词】  膀胱肿瘤　细胞凋亡　bclxl

　　bclxl是新发现的bcl2家族成员，能够抑制细胞凋亡，但对其在膀胱癌中的作用了解甚少。我们应用免疫组化方法结合原位细胞凋亡检测法检测bclxl在正常膀胱和膀胱癌组织中的表达，并探讨其与肿瘤细胞凋亡之间的关系。

    1资料与方法

    1.1资料  收集膀胱移行细胞癌存档的石蜡包埋标本88例，年龄15～81岁，中位年龄52岁。男67例，女21例。按WHO分级标准：Ⅰ级28例，Ⅱ级35例，Ⅲ级25例；按UICC分期：T0～1期57例、T2～4期31例。77例获随访1年以上，复发19例。12例正常膀胱粘膜作为对照。免疫组化方法采用SABC方法。bclxl（1∶100，抗原热修复）为兔抗多克隆抗体， DAB显色，苏木素复染。PBS替代

    1.2结果判断bclxl阳性染色主要分布于细胞浆和部分细胞核中，呈棕黄色或棕褐色。按阳性细胞数分为：阴性（）、阳性（+）细胞数1%～25%、（++）26%～50%和（+++）>50%四个等级。凋亡指数：至少计数500个癌细胞中的凋亡阳性细胞百分比。

    1.3统计学方法采用χ2检验和t检验。

    2结果

    膀胱癌组织中bclxl阳性表达率为62.5%（55/88），显著高于正常膀胱组织的33.3%(4/12)， P<0.05。膀胱癌组织中bclxl表达随肿瘤病理分级、分期增高而增强（P<0.05），与肿瘤复发之间也存有显著关系（P<0.05），见表1。

    本组对55例膀胱癌组织中bclxl表达与细胞凋亡之间关系进行分析：21例膀胱癌bclxl阴性表达者平均细胞凋亡指数为10.1±3.2，34例bclxl阳性表达者平均细胞凋亡指数为7.1±2.1，P<0.01。Relationships bewteen expression of

    3讨论

    细胞凋亡障碍导致突变细胞继续进入细胞周期，引起激活的癌基因和缺陷的抑癌基因累积，从而参与恶性肿瘤的发生。研究已显示多种细胞凋亡调控分子异常与膀胱癌的发病有密切关系[5]。bclx基因是第二种具有抑制细胞凋亡作用的bcl2家族成员，能够拷贝两种不同的蛋白，一种是由241个氨基酸组成、与bcl2有47%同源，具有抑制细胞凋亡功能的长链bclxl；另一种由178个氨基酸组成、具有促进细胞凋亡功能的短链bclxs[1]。研究表明bclxl异常与多种肿瘤的发生有密切关系。Cheung等[2]研究显示myc转基因鼠仅9.3%发生B细胞瘤，而myc/bclxl双转基因鼠100%发生浆细胞瘤；此外，一些报道显示bclxl异常与结肠癌、肾癌等的发生有密切关系[3,4]。有关膀胱癌中bclxl的研究目前较少。Kirsh等[5]报道了bclx在膀胱癌组织中表达增强，其主要成分为bclxl；最近，Gazzaniga等[6]研究发现浅表膀胱癌组织中bclx也主要以bclxl形式表达，表达率为36.6%。

    本组结果显示，膀胱癌组织中bclxl阳性表达率为62.5%，显著高于正常膀胱组织的33.3%，提示bclxl异常高表达参与膀胱癌的发病过程。同时，本组结果显示膀胱癌组织中bclxl阳性表达者细胞凋亡指数显著低于阴性表达者，提示bclxl表达与膀胱癌细胞凋亡之间密切相关，bclxl高表达能够抑制细胞凋亡，表明由于bclxl异常高表达导致细胞凋亡减少、细胞累积增多，最终促使膀胱癌的发生发展。上述研究结果提示bclxl有望成为膀胱癌治疗新的靶基因。

    有关bclxl与肿瘤生物学行为之间的关系目前研究较少。Gazzaniga等[6]发现bclxl表达能够预示浅表膀胱癌的术后复发，但在胃癌、结肠癌、肾肿瘤中并没有发现bclxl表达与肿瘤预后之间的密切关系[2,3,7]，这可能与肿瘤异质性有关。本研究结果显示随着膀胱癌病理分级、分期的增高，bclxl表达也增强，而且复发者bclxl表达也显著高于无复发者，提示bclxl表达与膀胱癌恶性程度、侵润深度和有无术后复发密切相关，有望成为膀胱癌生物学行为新的标记物。

  参考文献：

【参考文献】  　　［1］ Gonzalezgarcia M,PerezBallestero R,Ding L,et al.bclXL is the major bclx mRNA form expressed during murine development and its product localizes to mitochondria［J］.Development,1994,120(10):30333042.

［2］Cheung WC,Kim JS,Linden M,et al.Novel targeted deregulation of cMyc cooperates with BclX(L) to cause plasma cell neoplasms in mice［J］.J Clin Invest,2004,113(12):17631773.

［3］Gobe G,Rubin M,Williams G,et al.Apoptosis and expression of Bcl2,BclXL,and Bax in renal cell carcinomas［J］.Cancer Invest,2002,20(3):324332.

［4］Ma XT,Wang S,Ye YJ,et al.Constitutive activation of STAT3 signaling pathway in human colorectal carcinoma［J］.World J Gastroenterol,2004,10(11):15691573.

［5］Kirsh EJ,Baunoch DA,Stadler WM.Expression of bcl2 and bclx in bladder cancer［J］.J Urol,1998,159(4):13481353.

［6］Gazzaniga P,Gradilone A,Giuliani L,et al.Expression and prognostic significance of LIVIN,SURVIVIN and other apoptosisrelated genes in the progression of superficial bladder cancer［J］.Ann Oncol,2003,14(1):8590.

［7］邬万新，江悦琴，姜叙诚.Caspase3和bclxl在胃癌中表达的意义［J］.癌症，2001,20（7）：726729.