SLE患者血清抗核小体抗体的检测

　　作者：张晓军　　作者单位：南京医科大学第一附属医院 皮肤性病科，江苏 南京 210029

　　【摘要】 目的 研究抗核小体抗体(ANuA)检测对系统性红斑狼疮(SLE)、狼疮性肾病(LN)的诊断价值。方法 收集2005年1月至8月我院门诊和住院的186例SLE患者(其中141例合并LN)的血清，检测ANuA、抗ANA、dsDNA和ENA(Sm、RNP)抗体。结果 115 例SLE活动期患者，99例ANuA阳性，其中93例为LN，ANuA阳性率86.1%;71例SLE缓解期患者，39例ANuA阳性，其中23例为LN，ANuA阳性率54.9%。ANuA检测对SLE的灵敏度为74.2%，对LN的灵敏度为82.3%。结论 ANuA可作为除抗dsDNA和Sm抗体外诊断和判断SLE活动性，尤其是诊断LN的一种新的抗体。

　　【关键词】 抗核小体抗体 系统性红斑狼疮 狼疮性肾病 酶联免疫吸附试验

　　系统性红斑狼疮(SLE)是一种侵犯全身结缔组织和多个器官的炎症性自身免疫病，早期表现多种多样。狼疮性肾病(LN)是SLE最常见和最严重的内脏损害，约占SLE患者的60%～80%。肾脏损害可出现于本病任何阶段，以第1年最多，临床上肾外表现与肾脏病变并无明显平行关系。近来研究发现，核小体在LN的发病过程中起着重要作用。本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测186例SLE患者血清中抗核小体抗体(ANuA)，分析ANuA对SLE、LN的诊断价值。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　血清标本来自于2005年1月至8月我院门诊和住院的186例SLE患者，其中女166例，男20例，年龄15～60岁，平均(32±10)岁。根据临床表现及实验室检查指标，参照SLE临床活动指数对SLE患者评分，其中SLE活动期115例，缓解期71例,合并LN141例。

　　1.2 方法

　　ELISA法检测血清ANuA，所需试剂购自德国欧蒙实验室免疫制品有限公司。微孔板用小牛胸腺纯化天然核小体包被，血清经1∶200稀释后加入微孔板温育;洗涤后再加入过氧化物酶标记的兔抗人IgG温育;再洗涤，最后加入色原四甲基联苯胺和底物过氧化氢显色。以1mol•L-1磷酸作为终止液,用奥地利CB128酶标仪450nm波长比色,用6份标准血清浓度和其吸光度作标准曲线,据标准曲线求出血清标本中抗核小体抗体浓度。SLE患者血清抗ANA、dsDNA抗体用间接免疫荧光法检测，抗ENA(Sm、RNP)抗体用免疫印迹法测定，试剂盒均购自德国欧蒙实验室免疫制品有限公司。

　　1.3 统计学处理

　　数据的比较采用χ2 检验，由SAS软件完成，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 SLE活动期与缓解期患者血清ANuA比较

　　SLE活动期ANuA阳性率为86.1%，缓解期为54.9%，活动期高于缓解期，差异有统计学意义(P<0.01)。 SLE活动期与缓解期患者血清ANuA阳性率比较

　　2.2 SLE患者自身抗体检测结果

　　186例SLE患者ANuA阳性138例，其中116例为LN，ANuA检测对SLE的灵敏度为74.2%(138/186)，对LN的灵敏度为82.3%(116/141)。ANuA检测对SLE的灵敏度高于抗dsDNA、Sm、RNP抗体(均P<0.01)。SLE患者自身抗体敏感性比较

　　3 讨 论

　　SLE是一种以多系统损害伴多种自身抗体为特征的免疫性疾病。SLE患者血清中常检测到大量的自身抗体，其中以抗dsDNA抗体与发病关系最为密切。DNA与抗DNA抗体形成的可溶性免疫复合物沉积于肾小球基底膜及小血管内膜下，激活补体造成炎症反应，引起肾脏病变。虽然抗dsDNA抗体特异性高，但临床阳性检出率低。Tax等[1]认为这些抗体的产生与SLE患者淋巴细胞凋亡有关，细胞凋亡过程中所释放的核小体在ANuA的产生中具有重要意义。核小体作为自身隐蔽抗原或免疫性颗粒,诱发对核小体抗原特异的辅助性T细胞自身免疫耐受异常，从而激活B淋巴细胞产生ANuA、抗DNA抗体等。实验表明，在狼疮鼠中，核小体所刺激CD+Th细胞诱导抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体的产生，但是ANuA仅对核小体起作用，并不与其成分中的DNA或组蛋白反应，且先于抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体形成[2],ANuA的效价与疾病的活动性成正相关。本研究采用ELISA法检测了186例SLE患者血清ANuA，发现其阳性率为74.1%，141例LN患者中ANuA阳性率为82.3%。从本研究可见,SLE患者活动期与缓解期血清ANuA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。我们在实验中还发现，186例SLE患者中74例抗dsDNA抗体阳性，伴ANuA阳性67例;而在抗dsDNA抗体阴性的SLE患者中，有64例ANuA阳性，占 57.1%，其中38例LN患者血清ANuA阳性，占33.9%，与国外报道[3]相近。由于抗DNA抗体仅是ANuA谱中的一种亚型，因此，ANuA的检测对临床上抗dsDNA抗体阴性的LN患者很有帮助。

　　SLE标志性抗体为抗dsDNA和Sm抗体，这两种抗体对诊断SLE特异性高，但因其灵敏度低，故阳性率不高，抗dsDNA抗体阳性率为30%～40%，抗Sm体抗阳性率也只有20%～30%，而ANuA的阳性率为74.1%，明显高于抗dsDNA和Sm抗体阳性率(P<0.01);且在LN患者中，ANuA的阳性率高达82.3%，这就大大提高了SLE及LN诊断的敏感性，对早期的脏器损害诊断有极大的意义，国外也有文献报道ANuA的检测在SLE的诊断和疾病监测中有重要作用[4]。关于LN患者肾活检结果与AnuN检查的关系，目前尚未见相关报道，有待于我们临床实验进一步探讨。

　　【参考文献】

　　[1]Tax W J,Kramers C,van Bruggen M C,et al.Apoptosis,nucleosomes,and nephritis in systermic lupus[J].Kidney Int,1995,48:666673.

　　[2]Chaber H,Amoura Z,Piette J C,et al.Presence of nucleosomerestricted antibodies in patients with systemic lupus erythematosus[J].Arthritis Rheum,1995,38:14851491.

　　[3]Min D J,Kim S J.Antinucleosome antibody:significance in lupus patients lacking antidoublestranded DNA antibody[J].Clin Exp Rheumatol,2002,20:1318.

　　[4]Kiss E,Lakos G,Nemeth J,et al.Significance of antichroitin autoantibodies in systemic lupus erythematosus[J].Orv Hetil,2001,142:17311736.