一叶秋碱对芬太尼镇痛效应的影响及其机制

　　作者：王来，付海啸，刘欢欢，倪玮玮，郭济东，武静茹 作者单位：1.徐州医学院麻醉学院，江苏徐州221002;2.徐州医学院麻醉生理学教研室，江苏徐州221004

　　【摘要】 目的 研究芬太尼的镇痛作用与GABAA受体的关系，探讨芬太尼镇痛作用的可能机制。方法 昆明种小鼠(雌性36只)按完全随机设计分成4组(n=9)：生理盐水组、一叶秋碱组(10 mg/kg)、芬太尼组(0.3 mg/kg)、一叶秋碱(10 mg/kg)+芬太尼(0.3 mg/kg)组。用热板法测定各组小鼠用药前后的痛阈。结果 一叶秋碱提高芬太尼的痛阈(P<0.05)。结论 芬太尼的镇痛作用与GABAA受体部分相关。

　　【关键词】 芬太尼;一叶秋碱;镇痛;热板法

　　芬太尼为阿片类镇痛药，其镇痛效力约为吗啡的100～180倍、哌替啶的550～1000倍[1]，并具有毒性低、对循环影响轻、时效短(15～30 min)、术后自主呼吸恢复快等优点。近年来，随着术后镇痛技术的广泛普及，为取得良好的围术期镇痛和镇静效应，术前应用地西泮等苯二氮艹卓类药物作为镇静药物，以芬太尼等阿片类药物进行术后镇痛的患者越来越多。然而，临床研究发现，以苯二氮艹卓类药物为麻醉前用药的患者，术后镇痛所需要的吗啡剂量增加，提示苯二氮艹卓类药物可能拮抗吗啡的镇痛效应，并对此联合用药的方法提出质疑[2-3]。后经王斌等[4]进一步研究证实地西泮可拮抗芬太尼的镇痛效应，并提出其机制可能与其激动苯二氮艹卓受体后增强γ- 氨基丁酸(GABA)的作用有关。研究表明GABAA受体与阿片类μ受体分布具有相关性[5]。以上两者均提示芬太尼的镇痛效应可能与GABAA受体有关[2-5]。鉴于目前国内对芬太尼激动阿片受体的机制研究较多，而其镇痛作用与GABAA受体是否相关，笔者尚未见这方面的报道。本实验拟观察芬太尼的镇痛作用与GABAA 受体的关系，探讨芬太尼镇痛作用的非阿片受体机制。

　　1 材料和方法

　　1.1 实验动物 清洁级昆明种雌性小鼠36只，体重18～25 g，由徐州医学院实验动物中心提供。

　　1.2 药品和仪器 枸橼酸芬太尼(江苏恒瑞医药有限公司生产)，一叶秋碱(江苏宜兴前进制药厂生产)，分别用生理盐水稀释成所需浓度。HH-42型快速恒温显水箱(购自上海禾丰制药有限公司，批号000202)。

　　1.3 动物分组及处理 将36只小鼠按完全随机设计分成4组(n=9)：生理盐水组(A组)、一叶秋碱(10 mg/kg)组(B组)、芬太尼(0.3 mg/kg)组(C组)、一叶秋碱(10 mg/kg)+芬太尼(0.3 mg/kg)组(D组)。用热板法测定各组小鼠用药前后的痛阈(pain threshold in hot-plate test，HPPT)。实验时，A组、B组、C组按照上述剂量分别腹腔注射生理盐水(0.25 ml/10 g)、一叶秋碱或芬太尼，D组在腹腔注射芬太尼(0.3 mg/kg) 5 min前先腹腔注射一叶秋碱(10 mg/kg)。

　　1.4 实验方法 用热板法[6]测定各组小鼠的HPPT。逐一将小鼠置于恒温水浴箱〔(55±0.5)℃〕，记录从其足部接触热板到开始舔后足的时间作为该小鼠的基础痛阈，剔除30 s内不舔后足、5 s内即舔后足或迅速跳跃者。记录给药后5、10、20、30和45 min时小鼠的HPPT，超过60 s者立即取出小鼠，以防足部烫伤，痛阈计为60 s。

　　1.5 统计学处理 数据均采用±s表示，用SPSS 11.5统计软件进行统计学处理。组内比较采用配对t检验，组间比较采用方差分析和q检验。检验水准：α=0.05。

　　2 结 果

　　从表1可以看出， A组、B组小鼠用药前后痛阈无明显变化。 C组于用药后5 min、10 min时痛阈提高，且5 min时达高峰(P<0.01)。D组小鼠痛阈于用药后5～30 min提高(P<0.05或P<0.01)。在用药后5～30 min均可见D组小鼠痛阈较C组小鼠痛阈延长(P<0.05)。表1 一叶秋碱对芬太尼镇痛作用的影响

　　3 讨 论

　　GABA是哺乳动物中枢神经系统主要的抑制性神经递质，其受体分为GABAA、GABAB、GABAC 3型。已经证实，很多临床使用的静脉麻醉药和吸入麻醉药都作用于GABAA受体，GABAA受体在脊髓和脊髓上水平的大量分布为其作用提供了作用靶点。

　　在预实验中发现，单独给予一叶秋碱4、8、10 mg/kg，小鼠的痛阈无明显变化，说明其本身无镇痛作用。而芬太尼为阿片类镇痛药物，可以提高小鼠的痛阈，且与GABAA受体的特异性阻断剂一叶秋碱合用后，小鼠痛阈较单独使用芬太尼组明显提高，提示一叶秋碱可增强芬太尼的镇痛效应。此结果支持王斌等[4]关于地西泮拮抗芬太尼的镇痛效应的机制可能与其激动苯二氮艹卓受体后增强GABA的作用有关的推论。

　　芬太尼的镇痛机制主要与其激活中枢阿片受体后启动痛觉下行调制系统有关，而GABAA受体介导的抑制性效应同样参与调控中枢痛觉下行调制系统，二者在分布上同样具有相关性[5]。激活脊髓GABAA受体可减弱阿片类药物的抗伤害作用[7]。一叶秋碱作为GABAA受体的特异性阻断剂，可减弱或阻断GABAA受体介导的抑制性效应，从而增强芬太尼的镇痛效应。仅仅阻断GABAA受体对小鼠痛阈无影响，而阻断GABAA受体后芬太尼的镇痛效应明显增强，推测芬太尼的镇痛作用与GABAA受体部分相关。其具体的机制尚待进一步研究。

　　【参考文献】

　　[1] 刘俊杰,赵俊,等.现代麻醉学[M].北京:人民卫生出版社,1995:222-223.

　　[2] Gear RW, Miaskowski C, Levine JD, et al. Benzodiazepine mediated antagonism of opioid analgesia [J]. Pain,1997,71(1):25-29.

　　[3] Daghero AM, Bradley EL Jr, Kissin I. Midazolam antagonizes the analgesic effects of morphine in rats [J]. Anesth Analg,1987,66(6):944-947.

　　[4] 王斌,仲崇波,李军,等.地西泮拮抗芬太尼镇痛效应的实验研究[J].徐州医学院学报,2002,22(5):409.

　　[5] 高蓉，李云庆，施际武，等.大鼠中枢运动核团内谷氨酸受体、GABAA受体、甘氨酸受体和阿片Λ受体的定位分布[J].解剖学报，1999,30(2):124.

　　[6] O′Boyle CJ, MacFie J, Mitchell CJ, et al. Microbiology of bacterial translocation in humans [J]. Gut,1998,42(1):29-35.

　　[7] Depaulis A, Morgan MM, Liebeskind JC. GABAergic modulation of the analgesic effects of morphine microinjected in the ventral periaqueductal gray matters of the rat [J]. J Brain Res,1987,436(1):223-228.