PTEN和PI3K在鼻咽癌中的表达及意义

　　作者：陈英杰 刘健 陶雅君 贾心善 作者单位：大连大学医学院病理教研室，辽宁 大连 116622

　　【摘要】 目的 观察鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)组织中PTEN和PI3K的表达，探讨其相互关系及其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组织化学方法检测PTEN、和PI3K在鼻咽癌组织与鼻咽部慢性炎症组织中的表达水平。结果 60例NPC患者中，PI3K表达的阳性率为 86.7%(52/60)，明显高于鼻咽部慢性炎症组60.9%(14/23)(P<0.05);PTEN的表达率为41.7% (25/60)，明显低于鼻咽部慢性炎症组65.2%(15/23)(P<0.01);PTEN的表达与PI3K的表达强度呈负相关(P<0.05)。结论 PI3K信号通路的激活与PTEN的抑制，可能在NPC的发生发展中起重要的作用。

　　【关键词】 鼻咽癌;PTEN;PI3K

　　PI3K/Akt/mTOR信号通路广泛存在于细胞中，通过调节细胞周期、蛋白质合成、细胞能量代谢等多种途径发挥重要的生理功能，在细胞的增殖、生长、分化过程中起着中心调控点的作用〔1〕。PTEN基因可以通过对该信号途径的负调控而抑制肿瘤的形成，PTEN基因的失活则可降低对该途径的抑制作用而引起细胞的癌变。有关鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)发病机制的研究目前多集中于与 EB 病毒相关的方面，本研究通过对PI3K/Akt/mTOR信号通路中两种关键蛋白的检测，探讨其在NPC发生中的作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 病例资料

　　60例经有经验的病理医师确诊为鼻咽癌的活检标本取自中国医科大学第一临床医院，病人年龄24～71岁，中位年龄43岁，其中男44例，女16例。按WHO组织学分类，19例为分化型非角化癌，41例为未分化型非角化癌。所有标本经过10%中性福尔马林固定后，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，分别做HE与免疫组化染色。

　　1.2 免疫组化方法

　　该研究选用的所有单克隆抗体购于Cell Signaling公司，SP试剂盒与DAB显色液购于福州迈新公司。常规SP染色方法按试剂盒说明书进行，一抗的工作浓度：PTEN为1∶50，PI3K为1∶60，用PBS代替一抗为阴性对照。免疫组化染色结果参考如下标准判定：有明显的胞浆或胞核染为棕黄色的细胞为阳性细胞，并按下列标准分级：阴性(-)无胞浆/胞核阳性信号;弱阳性(±)，细胞数1%～25%;阳性(﹢)为胞浆/胞核弱阳性，阳性细胞数26%～50%;中度阳性()为胞浆/胞核中度阳性，阳性细胞数51%～75%;强阳性()为胞浆/胞核深度阳性，阳性细胞数>75%。

　　1.3 统计学分析

　　PTEN与PI3K之间相互关系用Chisquare方法分析。

　　2 结 果

　　60例NPC患者中，PI3K阳性信号主要位于鼻咽癌细胞胞浆内，阳性率为86.7%(52/60)，明显高于鼻咽部慢性炎症组60.9% (14/23)(P=0.037);PTEN的表达率为41.7% (25/60)，明显低于鼻咽部慢性炎症组65.2% (15/23) (P=0.008)。PTEN阳性信号主要见于鼻咽癌细胞胞核，PTEN呈阳性表达的25例病例中，PI3K中高强度阳性表达的为9例(36.0%)，一般阳性与弱阳性表达为16例(64.0%);PTEN的阳性表达与PI3K的阳性表达强度呈显著负相关(P=0.007)。

　　3 讨 论

　　磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)家族参与多种信号通路，正常情况下由其活化而产生的类脂3,4二磷酸酯酰肌醇(PIP2)和3,4,5三磷酸酯酰肌醇(PIP3)作为第二信使结合并激活多种细胞内的靶蛋白，形成一个信号级联复合物，最终调节细胞的增殖、分化、生长与迁移〔1〕。本研究发现PI3K蛋白在NPC细胞中的表达强于鼻部慢性炎症，提示PI3K信号通路的激活可能参与鼻咽癌的发生。

　　PTEN基因又名与张力蛋白同源、第10染色体丢失的磷酸酶(phosphataseand tensin homolog deleted on chromosometen PTEN)基因，位于人染色体杂合体缺失高发区10q23.3上，也是迄今发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因。在正常细胞中PTEN通过 PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥抑癌作用，PTEN蛋白可拮抗磷脂酰肌醇激酶PI3K的作用，使其作用的底物去磷酸化，降低细胞内PIP2和PIP3含量，对PI3K/Akt/mTOR信号通路起负调控的作用。有研究发现PTEN基因的失活与子宫内膜癌、肝细胞癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、胆管癌等许多恶性肿瘤的发生有关〔2～5〕。另有研究者发现将野生型PTEN基因转染至PTEN突变及缺失的人脑胶质瘤细胞中，可明显抑制细胞的增殖并具有促进其分化的作用〔6〕。本研究发现在NPC细胞中PTEN的表达弱于鼻咽部慢性炎症组织且与PI3K的阳性表达强度呈负相关，提示PTEN基因抑制所引起PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活及其所产生的作用可能是NPC肿瘤细胞增殖的机制之一。

　　【参考文献】

　　1 Shamji AF，Nghiem，P，Schreiber Sl.Intergration of growth factor and nutrient signaling：implications for cancer biology〔J〕.Mol Cell，2003;12：27180.

　　2 Mark GS，Leigh AB，Megan MK,et al.PTEN induced vascular endothelial growth factor secretion in head and neck squamous cell carcinoma〔J〕. Biochem Biophys Res Commun，2005;331:295302.

　　3 Alvin D，Thompsom Ⅲ，Sham SK.Insulin and PTEN regulate the expression of the pituitary tuomor transforming gene in breast tumor cells〔J〕. FEBS Lett，2005:579:3195200.

　　4 David D，Kyung S.Crosstalk between PTEN and TGFβ signaling pathways〔J〕.Cytokine Growth Factor Rev，2006;17:5974.

　　5 刘民锋,罗 剑，余险峰，等.PTEN和mTOR信号转导通路在胆管癌发展中的作用〔J〕.中国普通外科杂志，2006;15:2746.

　　6 李 平，钟雪云，秦艳芳，等.PTEN在人脑胶质瘤细胞中的表达及其对细胞增殖的影响〔J〕.癌症，2007;26:24751.