JAK2激酶抑制剂AG490抑制喉鳞癌细胞 侵袭力的实验

　　作者：路秀英,李晓明　王俊阁 作者单位：石家庄,中国人民解放军白求恩国际和平医院耳鼻咽喉头颈外科;2.河北省人民医院耳鼻咽喉科

　　【关键词】 喉鳞癌;信号转导子和转录激活子3;肿瘤浸润

　　0 引言

　　信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)是信号转导子和转录激活子家族的重要成员，在多种肿瘤细胞中STAT3过度激活，导致细胞异常增殖与过度转化[1]，本实验应用JAK2(Janus kinase 2)激酶抑制剂AG490处理喉鳞癌Hep2细胞，观察其对喉鳞癌细胞增殖活性以及侵袭力的影响，探讨JAK2/STAT3信号转导通路在喉鳞癌细胞侵袭调控中的作用。

　　1 资料和方法

　　1.1 AG490抑制喉鳞癌细胞Hep2细胞JAK2/STAT3信号转导通路活化

　　流式细胞术检测结果显示AG490能明显抑制pSTAT3表达，pSTAT3表达AG490组与对照组相比，作用24h对照组荧光指数为(1.361±0.022)，AG490组为(1.254±0.037)，两组比较差异有统计学意义(P<0.05);作用48h对照组荧光指数为(1.353±0.023)，AG490组为(1.134±0.034)，两组比较差异有统计学意义(P≤0.01); 72h对照组荧光指数(1.3451±0.014)，AG490组为(1.3451±0.014)，两组比较差异有统计学意义(P≤0.01)(图略)。

　　1.2 AG490对喉癌细胞系Hep2细胞增殖活性的抑制作用

　　MTT检测表明对照组没有抑制肿瘤细胞的增殖作用，AG490作用后不同时间检测，转染后12h开始表现出一定的增殖抑制效应，36h表现出明显的抑制效应，细胞活力持续下降(F=5.26，P=0.004)。

　　1.3 AG490抑制喉鳞癌细胞Hep2细胞侵袭力以定量Matrigel侵袭实验检测Hep2细胞侵袭力的变化,结果显示AG490处理24h侵袭细胞数(26.923±1.556)与对照组(31.517±2.038)相比差异有统计学意义(t=3.102，P<0.05);AG490处理48h和72h侵袭细胞数(56.370±2.552，66.813±20.056)与对照组(78.070±2.575，106.443±2.796)相比差异有统计学意义(t=10.367，19.775，P均<0.01)。

　　2 讨论

　　STAT3在正常组织细胞信号转导中激活快速而短暂，而在很多人类恶性肿瘤中STAT3过度激活与表达。JAK2 作为上游激酶活化后募集胞浆中的STAT3单体,使STAT3 分子酪氨酸磷酸化。我们前期利用免疫组织化学技术检测了喉鳞癌组织中STAT3及磷酸化的STAT3的表达，发现STAT3及磷酸化的STAT3的过表达与喉鳞癌的淋巴结转移密切相关[2]。本研究应用AG490阻断JAK2/STAT3信号转导通路来进一步证实此通路与肿瘤侵袭转移的关系。本文应用AG490处理喉鳞癌细胞株Hep2，实验证实可以抑制磷酸化STAT3含量，同时Matrigel侵袭实验显示AG490可以抑制喉鳞状细胞癌Hep2细胞侵袭，提示JAK2/STAT3信号转导通路参与喉鳞状细胞癌侵袭调控。阻断JAK2/STAT3信号转导通路可以抑制喉鳞状细胞癌侵袭,本文为喉鳞状细胞癌侵袭及转移的治疗提供了新的思路和靶点。

　　【参考文献】

　　[1] Hambek M, Baghi M, Strebhardt K, et al. STAT 3 activation in head and neck squamous cell carcinomas is controlled by the EGFR[J]. AnticancerRes，2004，24(6): 38813886.

　　[2] 王俊阁，李晓明，陈英会，等.信号转导和转录激活因子3在喉癌组织中的表达及其临床意义[J].临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2007，21(3)：113115.