42例急性淋巴细胞白血病染色体核型的分析

　　作者：刘伟 申徐良 郭睿鹏 欧玉英

　　摘 要 目的:检测ALL患者染色体异常核型与疗效的关系。方法:通过直接法对42例ALL患者的骨髓/外周血细胞进行染色体核型分析。结果:42例ALL患者中，正常核型10例(23.8%)，异常核型32例(76.2%)，其中结构异常19例(59.4%)，数目异常者9例(28.1%)，另有4例(12.5%)数目并结构异常者;儿童ALL染色体数目>50条的超二倍体的检出率显著高于成人ALL(P<0.05)，且疗效较好;而儿童ALL伴有t(9;22)异常核型的检出率却显著低于成人ALL(P<0.05)，与成人ALL伴有t(9;22)疗效无差异(P>0.05);伴有t(9;22)的异常核型与正常核型ALL疗效比较有差异(P<0.05)。结论:ALL患者染色体核型异常发生频率较高，重现性核型异常为t(9;22);染色体核型的改变与疗效有一定的关系，伴有t(9;22)的ALL患者，治疗反应差，而正常核型及其它异常核型的ALL患者治疗反应无明显差异。

　　关键词 染色体;核型分析;ALL

　　急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)是由肿瘤细胞(恶性淋巴细胞)克隆性增殖、积累，并有组织浸润所致的一类恶性血液病。60%～85%的ALL具有异常核型 [1] ，包括数目及结构改变，但这些异常核型变化的重现性有待研究总结。我们对42例ALL患者染色体核型的改变分别进行了分析，现报道如下。

　　1 资料和方法

　　1.1 研究对象

　　均为2001年～2005年收住我院血液科的ALL患者，成功进行染色体核型检查者共42例。42例患者中男性24例，女性18例，中位年龄17岁(2岁～56岁)。年龄≤14岁者称为儿童ALL，共20例，年龄>14岁，<60岁者称为成人ALL，共22例。所有病例均根据临床表现、周围血象、骨髓细胞形态学、细胞化学染色及流式细胞仪免疫分型检查确诊，符合《血液病诊断及疗效标准》 [2] 。

　　1.2 实验方法

　　1.2.1 细胞遗传学检查:取患者的骨髓和/或外周血，接种于含有25%新生小牛血清的RPMI1640培养基内(外周血WBC>10×10 9 /L，原始细胞>10%)，立即加入秋水仙素，终浓度为0.05μg/mL，摇匀后于37℃恒温箱内放置1h，收获细胞。用预温至37℃的0.075M的氯化钾溶液低渗30min，继以3∶1的甲醇-冰醋酸固定3次。气干法制片。玻片干后置烤箱中70℃下2h，次日作胰蛋白酶G显带。

　　1.2.2 分析方法:选择染色体分散、显带良好的中期分裂象进行核型分析，至少挑选3个分裂象直接在油镜下进行核型分析。核型分析依据《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN1995)》描述 [3] 。在进行染色体核型分析时，至少有2个分裂象具有相同的染色体异常或3个细胞存在同样的染色体丢失才能称为异常核型;至少10个分裂期细胞无异常存在方可定为正常核型 [4] 。

　　1.2.3 各例ALL患者的治疗均采用相似诱导方案进行化疗，一个疗程结束后，根据《血液病诊断及疗效标准》 [2] 评价疗效。

　　1.3 统计方法

　　两组间资料比较采用χ 2 检验。

　　2 结果

　　2.1 染色体核型分析

　　42例ALL患者中，正常核型10例(23.8%)，异常核型32例(76.2%)，其中结构异常19例(59.4%)，数目异常者9例(28.1%)，另有4例(12.5%)数目并结构异常者。在结构异常的核型中，t(9;22)11例，t(1;14)、t(1;7)各1例，其它染色体核型异常表现为断裂、缺失和重复，涉及到的染色体包括1(3例)、9(3例)、10(2例)、其它如2、6、12、22等各1例;在数目异常的染色体核型中，涉及到的染色体包括+21(3例)、+20(3例)、+8(3例)，其它如3、5、7、10等各1例。各种异常核型改变及疗效如表1所示。表1 32例ALL的染色体核型异常及疗效

　　2.2 染色体核型的改变与疗效关系

　　根据《血液病诊断及疗效标准》，一疗程后，CR率为71.4%，PR率为9.5%，NR率为19.1%。染色体核型异常与疗效关系见表2。表2 染色体核型异常与疗效的关系从表中可见，t(9;22)是ALL患者不良预后的遗传学标志，而其它数目异常和结构异常与正常核 型对化疗敏感性无明显差异。

　　2.3 成人ALL和儿童ALL染色体核型异常的比较

　　儿童ALL染色体数目>50条的超二倍体检测出5例，其中4例CR，1例NR;成人ALL染色体数目>50条的超二倍体检测出1例，获CR。在儿童ALL中伴有t(9;22)异常核型检测出2例，1例CR，1例PR;而在成人ALL中伴有t(9;22)的异常核型检测出9例，3例CR，2例PR，4例NR。伴有t(9;22)的成人ALL和儿童ALL患者的疗效比较无差异(P>0.05)，伴有t(9;22)ALL患者与正常核型ALL患者疗效比较有差异(P<0.05)。

　　3 讨论

　　染色体的检查对于急性淋巴细胞白血病的诊断、治疗、预后具有重要价值。从总体上看，ALL的染色体异常具有随机性，它与急性非淋巴细胞白血病(ANLL)及慢性粒细胞白血病(CML)等不同，目前仍未发现具有特异性的遗传学标志性染色体。伴有t(9;22)是一个常见的白血病染色体改变，儿童ALL中约有5%伴有此种异常，而成人ALL则高达20%～30%的发生率 [6] 。其出现于ALL，常提示早期耐药的出现，治疗反应差，预后恶劣。本组研究中，成人ALL伴有t(9;22)异常者9例，儿童ALL伴有t(9;22)异常者2例，统计学分析P<0.05。t(9;22)检出率略高于文献报告 [5] ，可能与病例数偏少有一定的关系。12p异常，包括缺失和易位。12p-是儿童ALL缺失的热点。在本组研究中，我们只检测到1例儿童ALL的异常核型:46，XY，12p-，并未检测到易位和缺失;而成人ALL中，我们未发现有关12号染色体的异常。

　　从理论上讲，染色体数目在47条～50条或>50条的超二倍体中，各条染色体的增加均可见到。在本组ALL患者中我们检测出6例>50条超二倍体的异常核型，其中5例为儿童ALL，4例获CR，1例获PR，>50条超二倍体及正常核型的儿童ALL，对化疗较敏感，完全缓解率较高;而成人ALL却只检出1例，获CR。非随机性丢失或获得一个染色体在ALL中是非常常见的，但极少为一独立核型，同时还伴有其他核型的存在(或正常核型，或异常核型)。在第三届国际白血病染色体研究组(TIWCL)的报告中显示+21是最常见的染色体获得。在本组研究中，常累及的染色体为+21、+8、+20。

　　参考文献

　　[1] 薛永权.白血病细胞遗传学及图谱.天津:天津科学技术出版 社，2003，61～65.

　　[2] 张之南.血液病诊断及疗效标准.科学出版社，1998，184～193.

　　[3] Mitelman F，ed.Guidelines for Cancer Cytogenetics，Supplementto An International System for Human Cytogenetic Nomenclature(IS- CN).New York:Karger，1991，4.

　　[4] Schiffer A，Lee J，Tomiyasu T，et al.Prognosis impact of cyto-genetic abnormalities in patientswith de novo acute nonlymphocytic leukemia.Blood，1989，73:263～270.

　　[5] 周见远.急性白血病的染色体改变.中华医学杂志，1984，64(5):305～308.

　　[6] 沈志祥.血液肿瘤学.北京:人民卫生出版社，1999，36