溶血和脂血标本对电阻抗法血细胞分析仪计数血小板的影响

　　作者：马菊芬 李建忠 郭李娜

　　摘 要 目的:探讨溶血和脂血标本对电阻抗法血细胞分析仪计数血小板的影响。方法:随机选取检查血常规正常标本15例，脂血标本15例，溶血标本15例，共45例。采用电阻抗法血细胞分析仪和目视显微镜法对45例血标本进行血小板的计数。结果:15例正常标本电阻抗法血细胞分析仪计数和目视显微镜计数的结果无显蓍性差异(P>0.05)，15例脂血标本和15例溶血标本电阻抗法血细胞分析仪计数和显微镜计数的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:电阻抗法对脂血和溶血标本的测定可导致血小板计数偏高。

　　关键词 血细胞分析仪;显微镜计数;血小板计数

　　近年来，临床上逐渐出现减少预防性血小板输血的趋势。研究表明，如果临床医生对评价出血风险的血小板计数的可靠性有充分的信任，预防性血小板输血的医学决定水平可以由20×10 9 /L降低至5×10 9 /L。为了保证作出正确和安全的临床决策，关键是血小板计数不仅要精密，而且更要准确。因此，选择一种准确血小板计数方法和采集合格的标本，具有重要的临床意义。本试验通过用仪器和手工两种方法对血小板计数进行对比，探讨其应用价值，使之为临床精确计数血小板提供参考。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 仪器和试剂:采用日本Sysmex K-4500电阻抗法血细胞分析仪及原装配套试剂和目视显微镜计数及严格按照《全国临床检验操作规程》配制的草酸铵稀释液，对45例患者标本进行血小板计数，实验前已做好质控，空白计数符合标准。

　　1.1.2 标本:随机选择来我院检查血常规的患者标本45例，其中正常标本15例，脂血标本15例，溶血标本15例，血细胞分析仪采用的标本是抽取静脉血1mL加入到硅化内壁的EDTA-K 2 抗凝管中混匀。目视显微镜计数法采用同一血标本20μL，加入到盛有0.38mL的草酸铵稀释液的清洁塑料试管中混匀，所有血液标本均在采集后室温(18℃～22℃)放置，4h内完成各种方法计数血小板。

　　1.2 方法

　　1.2.1 采用日本Sysmex K-4500血细胞分析仪，对45例标本进行血小板计数，每个样本计数3次，取平均值。

　　1.2.2. 采用目视显微镜计数法对45例标本进行血小板计数，每个样本计数3次，取平均值。

　　2 结果

　　45例标本用两种方法计数血小板结果比较见表1。表1 电阻抗法与目视显微镜法计数血小板结果比较注:脂血和溶血越严重，差值越大表中列出了电阻抗法血细胞分析仪和目视显微镜两种方法对45例标本血小板计数结果进行了比较，15例正常标本两法比较无显著性差异(P>0.05)，15例脂血标本和15例溶血标本两法比较有显著性差异(P<0.05)。血细胞分析仪采用电阻抗原理计数血小板结果高于目视显微镜法计数。表明电阻抗法将红细胞碎片和脂血中与血小板大小相似的乳糜微粒等作为了血小板计数，导致血小板计数偏高。

　　3 讨论

　　电阻抗型血细胞分析仪有较好的重复性，但不能排除白细胞碎片、红细胞碎片、脂类和蛋白的聚集体等和血小板相类似颗粒的干扰，导致血小板计数偏高 [1] 。据有关资料报道，由于乳糜微粒的干扰，使电阻抗法计数血小板比流式细胞仪法高出两倍以上。采用流式细胞术原理计数血小板，使计数结果很少受到电阻抗法类似的干扰。目视显微镜法操作规程严格，准确性高，血小板易于识别，是血细胞分析仪校正的关键步骤 [2] ，可避免因红细胞碎片、颗粒等对血小板计数的干扰。为了使血小板计数准确，遇到脂血和溶血的的标本作血细胞计数时，应用流式细胞术和目视显微镜计数法作校正。

　　本试验结果表明:电阻抗法血细胞分析仪进行血小板计数时，正常标本两法比较无显著性差异(P>0.05)，脂血和溶血标本两法比较有显著性差异(P<0.05)，仪器法计数结果高于显微镜法。由此看来，电阻抗血细胞仪在计数血小板时，受到脂血和溶血的干扰，将红细胞碎片、乳糜微粒等作为了血小板计数，导致血小板计数偏高。因此，在使用电阻抗法血细胞分析仪作血细胞计数时，遇到脂血和溶血的标本应用目视显微镜法计数血小板进行复查校正，国内外仍将目视显微镜计数作为参考方法 [3] 。

　　参考文献

　　[1] 王建中，屈晨雪.三种流式细胞术计数血小板方法的比较研究.中华检验医学杂志，2003，26(1):12.

　　[2] 丛玉隆，王淑娟主编.今日临床检验学.北京:中国科学技术 出版社，1997，32～33.

　　[3] 寇丽筠主编.临床基础检验学.北京:人民卫生出版社，1997，55～57.