益气血补肝法在体外受精—胚胎移植治疗周期中对雌二醇、孕酮水平的影响

　　　作者：张金玉， 邓伟民， 葛明晓， 郭新宇， 于 妍， 谢素嫣

　　    作者单位：广州军区广州总医院妇产科辅助生育中心，广东广州

　　【摘要】 【目的】观察体外受精—胚胎移植周期(IVFET)患者加用益气血补肝法中药治疗对血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平的影响，探讨益气血补肝法提高胚胎种植率的作用机理。【方法】将行IVFET患者42例随机分为中药组(19例)及对照组(23例)，两组均采用常规方案治疗，中药组于应用基因重组促性腺素(γFSH)同时至绒毛膜促性腺激素(HCG)日加用经后增殖颗粒(由黄芪、党参、茯苓、当归、熟地、肉桂等组成)，移植日开始加用促黄体颗粒(由菟丝子、熟地、醋龟板、枸杞、淮山、党参、白术、山萸肉、鹿角胶等组成)。两组均于HCG日、胚胎移植日、种植窗日分别抽血检测血清E2、P水平。【结果】中药组HCG日、种植窗日E2水平明显高于对照组(P<0.05)，但两组各期血清P水平比较差异无显著性意义(P<0.05);中药组种植窗日E2和P水平明显高于同组移植日的水平(P<0.05)。【结论】益气血补肝法能显著提高种植窗期血清雌、孕激素水平，从而改善子宫内膜容受性，提高胚胎种植率。

　　【关键词】 体外受精—胚胎移植,雌二醇/血液, 孕酮/血液,益气生血, 补益肝肾

　　体外受精—胚胎移植周期(IVFET)中80%以上的患者有优质胚胎移植，但是妊娠率不超过50%，IVFET的成功率不高的重要原因之一是胚胎的种植率低。对于IVFET失败的病人，我们应用中医调整治疗后再次行IVFET治疗能取得一定效果。以往研究发现[1]，益气血补肝法能提高胚胎的种植率。本研究在IVFET患者加用益气血补肝法的中药治疗后，观察了该法对血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平的影响，旨在探讨中药对胚胎着床影响的机制。现将结果报道如下。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象 选择2007年7月至2007年12月间因输卵管因素不孕，在广州军区总医院辅助生育中心行IVFET治疗，年龄25～35岁，有优质胚胎移植，注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日子宫内膜形态A形、厚度0.8～1.5cm的患者42例作为研究对象，并随机分为中药组(19例)和对照组(23例)，两组年龄分别为(31.21±3.29)岁、(30.14±3.54)岁，黄体酮用量分别为(48.23±14.25)mg/d、(47.13±12.37)mg/d，两组年龄及黄体酮用量经统计学处理，差异无显著性意义(P>0.05)，具有可比性。

　　1.2 干预措施 两组均采用常规方案：于月经前7～8d应用达必佳1.25mg,于月经第4～6天应用基因重组促性腺素(γFSH)，B超监测卵泡，当1个卵泡直径>18mm或2个卵泡直径>17mm或3个卵泡直径>16mm时，于当日上午抽血(此为HCG日)，并于当晚肌注HCG10 000U;HCG注射后34～36h取卵;取卵第1天开始肌注黄体酮，根据HCG日E2水平决定应用黄体酮剂量，E2值在3000pmlo/L左右、6000pmol/L左右、>10 000pmol/L时分别用20、40、60mg/d黄体酮直至验孕;取卵后第3天胚胎移植(此为胚胎移植日);移植后第3天上午应用黄体酮前抽血(此为种植窗日);若妊娠则继续用药15d经B超检查确定临床妊娠。

　　中药组于应用FSH同时至HCG日服用经后增殖颗粒，每天2次，早晚各1包冲服;移植日开始服用促黄体颗粒，早晚各1包冲服。

　　1.3 药物 经后增殖颗粒：由黄芪、党参、茯苓、当归、熟地、肉桂等组成;促黄体颗粒：由菟丝子、熟地、醋龟板、枸杞、淮山、党参、白术、山萸肉、鹿角胶等组成。两种中药冲剂均为广东一方制药厂根据我院提供的药方生产。

　　1.4 检测指标 分别于HCG日、胚胎移植日、种植窗日抽血检测血清E2、P水平,均采用化学发光法测定，应用美国Beckman公司提供的仪器及试剂药盒。

　　1.5 统计学方法 采用SPSS 11.0软件包进行数据的统计分析。

　　2 结果

　　两组HCG日、胚胎移植日、种植窗日血清E2、P水平比较见表1。中药组HCG日、种植窗日血清E2水平明显高于对照组(P<0.05)，但两组各期血清P水平比较差异无显著性意义(P>0.05);中药组种植窗日E2和P水平明显高于同组移植日的水平(P<0.05)。表1 两组HCG日、胚胎移植日、种植窗日血清E2、P水平比较统计学方法：t检验;①P<0.05,与对照组比较;②P<0.05，与同组移植日比较

　　3 讨论

　　滤泡期雌激素产生于卵泡内的颗粒细胞，排卵后卵泡液及颗粒细胞丢失使雌激素水平急剧下降，排卵后的黄体细胞在促黄体生成素(LH)作用于开始成熟并分泌雌激素及孕激素，于种植窗日升高到峰值，该E2峰较排卵前峰值低，说明较高雌激素水平对种植有利。自然妊娠周期中，妊娠妇女黄体中期E2水平明显高于未孕妇女[2];Vicdan 等[3]研究了121例单精子卵细胞浆内注射受精(ICSI)患者的激素水平，发现取卵后第11～13天雌激素水平若升高，妊娠率明显升高，雌激素水平下降，妊娠率明显下降。Chen等[4]也有类似的发现，分析了697例IVFET周期，结果ET后第5天若E2水平高，则妊娠率也会相应升高。Lukaszuk等[5]将231例行IVFET治疗的患者分为3组，第1组给予黄体酮黄体支持，第2组给予黄体酮加E22mg，第3组给予黄体酮加E26mg，发现第3组种植率及妊娠率最高，说明一定的雌激素对胚胎种植是有益的。

　　正常有排卵的月经周期，排卵后颗粒细胞与卵泡膜细胞在低水平的LH刺激下黄素化，形成颗粒黄体细胞与泡膜黄体细胞，后者对LH敏感性高，排卵后5～10d黄体功能最旺盛，黄体在低水平的LH即能分泌E2、P。应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)抑制了体内LH的分泌，取卵时颗粒细胞丢失，加上控制性超促排卵后产生溶黄体作用使黄体分泌不足，所以IVF治疗均需要黄体支持。本研究显示，两组患者血清E2、P水平在胚胎移植后逐步升高，其中中药组种植窗日的激素升高比对照组更明显，推测E2、P水平升高的原因可能是由于超促排卵后多卵泡发育，取卵后虽然大量卵泡液及颗粒细胞丢失，使取卵后E2水平急剧下降，因此，胚胎移植日E2水平明显低于HCG日，但卵泡内膜细胞丢失少，大量卵泡内膜细胞在HCG作用下黄素化形成卵泡膜黄体细胞，卵泡膜黄体细胞对LH敏感性高，只需要很低水平的LH即能分泌E2、P，IVF周期中有多个黄体形成，所以E2、P分泌增加，血清E2、P水平逐渐升高且远高于自然周期，提示中药组的黄体功能优于对照组。

　　中医治疗不孕症有悠久的历史，临床上大多数医家对各种原因的不孕症采用中医辨证论治，如朱梅等[6]应用疏肝益肾的助孕丸治疗黄体功能不健型不孕症有明显疗效。刘艳娟等[7]应用具有补肾益气活血功效的健胎液治疗着床障碍的小鼠，发现可以增加子宫内膜雌、孕激素受体量。张明敏等[8]用补肾益气活血汤治疗多次助孕术失败的患者，再次助孕时，子宫动脉血流明显改善，子宫内膜明显增厚而有利于胚胎着床。本院妇产科辅助生育中心应用益气血补肝法于体外受精—胚胎移植治疗周期，能提高胚胎种植率[1]。中医理论认为，生殖有赖于肾气—天癸—冲任—胞宫之间的平衡协调作用，所以对不孕症的治疗多围绕着“肾主生殖”、“肝为女子先天”的理论而进行，本研究中的经后增殖颗粒用黄芪、党参、茯苓健脾益气，当归、熟地、肉桂补血养血，着重于补益气血以在增殖期增强子宫内膜生长;促黄体颗粒用菟丝子、醋龟板滋肾阴，鹿角胶温肾阳，枸杞、山萸肉、白术健脾疏肝，在种植期间着重于滋补肝肾，有助于受精卵着床。在IVFET周期中以补益气血、滋补肝肾而达到调经种子之功效。研究结果显示，通过补益气血、滋补肝肾，可以在种植窗期提高雌激素及孕酮水平，从而改善子宫内膜的容受性，提高胚胎种植率。

　　【参考文献】

　　[1]邓伟民，邵玉,张金玉,等.中药益气血补肝法对辅助生育胚胎种植率的影响[J].广州中医药大学学报,2008,24(2):106.

　　[2]Baird D D,Wilcox A J,Weinberg C R,et al.Preimplantation hormonal differences between the conception and nonconception menstrual cycles of 32 normal women[J].Hum Reprod,1997,12(12):2607.

　　[3]Vicdan K,Zeki Isik A.Luteal phase hormonal profile in prediction of pregnancy outcome after assisted reproduction[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,2001,96(1):98.

　　[4]Chen C H,Zhang X,Barnes R,et al.Relationship between peak serum estradiol levels and treatment outcome in vitro fertilization cycles after embryo transfer on day 3 or day 5[J].Fertil Steril,2003,80(1):75.

　　[5]Lukaszuk K,Liss J,Lukaszuk M,et al.Optimization of estradiol supplementation during the luteal phase improves the pregnancy rate in women undergoing in vitro fertilizationembryo transfer cycles[J].Fertil Steril,2005,83(5):1372.

　　[6]朱梅,刘琨.助孕丸治疗黄体功能不健型不孕症133例[J].中华中医药杂志,2006,21(8):479.

　　[7]刘艳娟,黄光英,杨明炜,等.健胎液对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素及其受体的影响[J].中国中药杂志,2005,30(5):373.

　　[8]张明敏,黄光英,陆付耳,等.补肾益气活血汤对多次助孕技术失败患者结局的影响[J].微循环学杂志,2002,12(2):10.