机器制备洗涤红细胞质量的探讨

　　作者：李建民,沈莉,张义兵,王慧茹,谢志坚　　作者单位：050071 石家庄市，河北省血液中心李建民、沈莉、张义兵、王慧茹、谢志坚、陈红霞 ;河北医科大学第三医院赵晓霞;山东威高集团医用高分子制品股份有限公司王建卫、赵忠敏;哈尔滨工业大学汽车学院姚玉峰

　　【关键词】 红细胞

　　目前国内血站系统洗涤红细胞制品大多采用手工开放式和封闭式洗涤方法来制备，尚无机器自动洗涤来制备洗涤红细胞制品的。手工制备的缺点是洗涤过程由人工来完成，受操作人员熟练程度、血液离心效果好坏等因素影响，在白细胞去除和红细胞回收环节上波动较大，直接导致洗涤红细胞制品质量的不稳定。为提高洗涤红细胞制品质量，我中心与山东威高集团医用高分子制品股份有限公司进行合作，研制开发自动完成红细胞洗涤的仪器及配套耗材制备洗涤红细胞制品。保证制备过程的程序化和封闭式操作，用在线白细胞过滤器去除白细胞，提高白细胞清除率和红细胞回收率，减少手工洗涤造成的红细胞过多损失，现就机器自动洗涤制备的24例红细胞制品质量的调查情况报告如下。

　　[1] 材料与方法

　　1.1 材料 洗涤仪器(山东威高集团医用高分子制品股份有限公司制造，图1)及配套洗涤耗材(河北省血液中心研究设计，山东威高集团医用高分子制品股份有限公司生产)、无菌导管连接器(日本泰尔茂TSCD 201A,德国费森尤斯Compodock)、总蛋白液体检测试剂(中生北控生物科技股份有限公司)、Counter ACTdiff 2血细胞计数仪(美国beckman公司)、采血袋(长春泰尔茂医用有限公司生产)。

　　图1 冼涤仪器示意图

　　1.2 机器洗涤的相关参数 生理盐水用量为1 000 ml、红细胞保存添加剂(MAP)用量为300 ml、在线滤器白细胞去除效果达99.9%以上、洗涤3次、离心力260 g、洗涤时间30～40 min。

　　1.3 机器洗涤红细胞的方法 按规定的方法在洗涤仪器上安装配套洗涤耗材(图1)，安装完毕后，将制备的经检验合格的2 U悬浮红细胞通过无菌导管连接器与配套耗材热封管进行连接，连接成功后启动仪器进行自动洗涤(机器运行程序已设定)。

　　1.4 洗涤红细胞质量检测方法 按文献[1]提供的方法对洗涤红细胞进行检测，并计算红细胞回收率、白细胞去除率和血浆蛋白清除率(检测方法按总蛋白液体检测试剂盒说明书提供的方法测定血浆蛋白)。

　　1.5 统计学分析 计数资料经对数转换后以±s表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　[2] 结果

　　机器自动洗涤制备的24例红细胞制品与手工制备60例(生理盐水和MAP洗涤各30例)红细制品质量的检测结果及对比见表1。表1 机洗红细胞制品质量检测情况

　　[3] 讨论

　　本研究结果显示，机器洗涤的红细制品符合红细胞回收率≥70%、白细胞清除率≥80%、血浆蛋白清除率≥98%的国家质量标准[1]，且质量均高于手工制备者。究其原因，笔者认为，因血浆蛋白清除率的高低与洗涤液的用量成正比，故而当洗涤液用量达一定时，就可达到较为满意血浆蛋白清除程度。机器洗涤的洗液量达1 000 ml较手工洗涤的洗液量约多250 ml。红细胞回收率高的原因，在于红细胞在离心、分离、洗涤以及废弃液排出的全过程，都是在红外线探头监控下完成的，减少了制备过程红细胞的不必要损失;对红细胞母袋的冲洗也减少了一部分红细胞的损失。因白细胞过滤器对血液中的白细胞去除率可达99.9%，采用白细胞过滤器替代手工去白膜的操作来去除白细胞，既显著提高白细胞去除率，又大大减少手工去白膜过程中导致的红细胞损失，这也是手工洗涤红细胞回收率低的主要原因。

　　采用无菌导管连的接血液成分，只要保证连接口完整、无渗漏、无气泡，其制品的保存期与密闭系统制备的血液成分保存期一致[2，3]。国内亦有文献报道正确使用无菌导管连接制备血液成份，可以保证制备过程的无菌，同时不造成血液的污染[4]。本实验用合格红细胞通过无菌导管连接机器洗涤来制备WRC制品正是基于上述考虑，此外，选择检验合格的血液可避免洗涤耗材的浪费。

　　综上所述，笔者认为，通过机器洗涤的方法来制备洗涤红细胞制品，在省时、省力、高效的基础上，可保证操作过程的规范化、标准化，减少人为因素导致的对洗涤红细胞制品质量的影响，大大提高洗涤红细胞制品质量，从而保证临床治疗效果，可以说机器洗涤红细胞较手工制备具有明显的优势，应在血站行业大力推广应用。

　　【参考文献】

　　[1] 中华人民共和国卫生部.中国输血技术操作规程(血站部分).天津科学技术出版社, 1997.40 41.

　　[2] Food and Drug Administration. Memorandum:use of an FDA cleared or approved sterile connection device(STCD) in blood bank practice. Rockville: CBER office of communication, Training and Manufacturer’s Assistance, 1994.7 29.

　　[3] AABB Technical Manual. Blood component preparation,storage,shipping,and transportation.22ed,New york:AABB.168 169.

　　[4] 李建民，沈莉，梁晓虎，等.无菌导管连接制备的血液成分的安全性探讨. 中国输血杂志,2004,17:425 426.